整合素α-,V-β-,3-與柯薩奇B組病毒感染以及柯薩奇B組病毒誘導凋亡的研究.pdf

1、整合素是一類重要的細胞表面受體,也是許多病毒感染宿主細胞的受體.為了研究整合素αvβ3在CVB感染細胞過程中的作用,以及CVB與整合素結合過程中RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)序列的作用,我們用不同濃度的抗整合素αvβ3單克隆抗體以及含有RGD序列的合成多肽封閉HeLa細胞表面的相應位點,再用CVB1-CVB6感染細胞,培養(yǎng)24h后,通過對細胞病變情況的觀察發(fā)現(xiàn),用180μg/ml和360μg/ml的抗體封閉后,分別有50％和75％的

2、細胞病變被抑制;用20μg/ml和40μg/ml的RGD封閉后,分別有50％和75％的細胞病變被抑制.因此我們認為,CVB感染細胞的過程中,整合素αvβ3是病毒感染和入侵的重要受體,但可能不是唯一的受體,尚存在其它有助于病毒入侵細胞的機制;同樣,整合素α<,v>β<,3>與病毒的結合利用了RGD序列,但可能還存在其他途徑.細胞凋亡是一種由基因控制的細胞自主性死亡方式,凋亡的細胞表現(xiàn)出特有的形態(tài)學改變.已知腸道病毒誘導的細胞凋亡存在兩種類

3、型:caspase依賴型和caspase非依賴型.為了證實柯薩奇B組病毒感染后是否會誘導細胞凋亡以及細胞凋亡的類型,我們將CVB1-CVB6感染HeLa細胞,通過觀察感染后3h、45h、50h、69h、74h的細胞形態(tài)以及將上述各時段的細胞裂解后進行western blot分析.我們發(fā)現(xiàn),細胞在感染后3h形態(tài)正常,感染后45h及以后各時段均表現(xiàn)出明顯的形態(tài)學變化,同時感染后細胞各時段的western blot在32KD處均出現(xiàn)一條強的c