IGF-1調(diào)控下染料木黃酮對(duì)睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細(xì)胞增生的抑制作用研究.pdf

1、[目的] 通過(guò)研究染料木黃酮（genistein，Gen）和胰島素樣生長(zhǎng)因子（insulin-like growth factor-1，IGF-1）對(duì)睪酮誘導(dǎo)增生的RWPE-1細(xì)胞的作用，觀(guān)察在適宜濃度的IGF-1調(diào)控下，Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)的細(xì)胞增生的抑制作用及對(duì)細(xì)胞周期的影響，同時(shí)通過(guò)對(duì)細(xì)胞周期蛋白和細(xì)胞周期蛋白激酶的測(cè)定，初步探討IGF-1調(diào)控下Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)的細(xì)胞增生抑制的分子作用機(jī)制。 [方法] 本實(shí)驗(yàn)采

2、用睪酮溶液刺激人前列腺正常上皮細(xì)胞（RWPE-1Cells）；MTT法測(cè)定IGF-1和Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細(xì)胞增生的影響，觀(guān)察在適宜濃度的IGF-1水平調(diào)控下，Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細(xì)胞增生的抑制作用；采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)IGF-1和Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)增生的RWPE-1細(xì)胞周期的影響，采用Western-Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IGF-1和Gen對(duì)異常增生的RWPE-1細(xì)胞周期蛋白CyclinB1、CyclinD1和細(xì)胞周期蛋白激酶C

3、DK4的影響。 [結(jié)果] （1）MTT法比色結(jié)果，Gen能夠抑制睪酮誘導(dǎo)的RWPE-1細(xì)胞增生，且隨著濃度的增加，抑制作用加強(qiáng)，40.00μmol/L的Gen作用3天是較為適宜的作用濃度和作用時(shí)間；IGF-1能夠促進(jìn)RWPE-1細(xì)胞的增生，且隨著濃度的增加，促進(jìn)作用加強(qiáng)，而6.4nmol/L的IGF-1作用3天是較為適宜的作用濃度和作用時(shí)間；而在適宜濃度的IGF-1水平調(diào)控下，Gen的抑制率高于單獨(dú)使用Gen的抑制率。

4、 （2）流式細(xì)胞儀結(jié)果，在適宜濃度的IGF-1水平調(diào)控下Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)增生的RWPE-1細(xì)胞的作用，使G1期細(xì)胞百分比較對(duì)照組減少，S期細(xì)胞百分比較對(duì)照組增加，G2/M期細(xì)胞百分比較對(duì)照組和單獨(dú)的Gen組均增加。 （3）Western-Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果，Gen上調(diào)CyclinB1的表達(dá)，下調(diào)CyclinD1、CDK4的表達(dá)；IGF-1上調(diào)CyclinB1、CyclinD1和CDK4的表達(dá)；在適宜濃度的IGF-1調(diào)控下，G

5、en上調(diào)CyclinB1的表達(dá)，下調(diào)CyclinD1、CDK4的表達(dá)。 [結(jié)論] （1）Gen能夠抑制睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細(xì)胞的增生，且呈濃度依賴(lài)趨勢(shì)。在適宜濃度的IGF-1調(diào)控下，Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細(xì)胞的抑制作用比單獨(dú)使用Gen效果更明顯。 （2）Gen對(duì)睪酮誘導(dǎo)的RWPE-1細(xì)胞增生的抑制作用可能是由于其對(duì)細(xì)胞周期G2/M期的阻滯作用，且在IGF-1的調(diào)控下其阻滯作用更為明顯。 （3）Gen