轉(zhuǎn)錄因子USF1在小鼠牙齒發(fā)育中的作用研究.pdf

1、尼古丁是損害牙胚并造成牙齒發(fā)育異常的重要原因之一,探討它對牙胚毒害作用的分子機制是防治其危害的關(guān)鍵.多年來,人們僅從流行病學調(diào)查和體內(nèi)實驗證實了這一現(xiàn)象,最近該科的實驗結(jié)果顯示尼古丁干擾了牙乳頭細胞的成熟和它們的重要生理功能;小鼠牙胚中有nAchR表達,尼古丁可通過nAchR損害牙齒發(fā)育并且上調(diào)其表達水平,但對于尼古丁這種作用的分子機制并不十分青楚.為了揭示轉(zhuǎn)錄因子USF1在牙齒發(fā)育過程中的調(diào)控作用并在此基礎(chǔ)上探討轉(zhuǎn)錄因子USF1在尼古

2、丁損害牙齒發(fā)育中的作用機制而進行實驗,其主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:一.轉(zhuǎn)錄因子USF1在小鼠牙齒發(fā)育中表達的研究; 該部分研究首先應用RT-PCR和Western blot方法確定牙胚中有USF1表達,并在此基礎(chǔ)上觀察了牙齒發(fā)育過程中USF1mRNA和蛋白水平的分布模式.二、轉(zhuǎn)錄因子USF1對成牙本質(zhì)細胞功能影響的研究;為了進一步正實轉(zhuǎn)錄因子USF1在牙齒發(fā)育中的功能,該部分實驗通過體外培養(yǎng)成牙本質(zhì)細胞MDPC-23,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染USF1和A

3、-USF1表達質(zhì)粒,并檢測細胞中USF1、骨橋素和TGF-β2表達的變化.三.轉(zhuǎn)錄因子USF1在尼古丁損害鼠牙齒發(fā)育中的作用研究;為了探討轉(zhuǎn)錄因子USF1在尼古丁損害牙齒發(fā)育中的作用機制,該部分研究在進一步觀察尼古丁對小鼠牙齒發(fā)育影響的基礎(chǔ)上,檢測尼古丁對成牙本質(zhì)細胞中轉(zhuǎn)錄因子USF1轉(zhuǎn)位、表達水平和細胞內(nèi)Ca<'2+>濃度等的影響.綜合以上實驗結(jié)果,該研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子USF1不僅在牙齒發(fā)育過程中有非常特異的時間、空間和細胞類型表達模式