移植靜脈再狹窄進程中Sesn1蛋白的初步研究.pdf

1、目的：
　　在兔自體移植靜脈再狹窄模型的基礎上，采用多種研究方法，探究移植靜脈再狹窄過程中調(diào)控這一過程的關鍵蛋白，為闡明移植靜脈再狹窄的具體機制打下前期基礎。
　　方法：
　　將42只健康純種新西蘭大耳白兔隨機分為7組，建立兔頸外靜脈頸總動脈旁路移植術模型，分別將假手術組正常靜脈、術后第1、3、7、14、28、90天移植靜脈取出，通過對其進行狹窄程度、PCNA蛋白水平、凋亡等相關檢測，確立PCNA蛋白表達差異的時間點后

2、，建立相應時間點的動物模型，并取移植靜脈行全基因組表達譜芯片及qRT-PCR等檢測。
　　結果：
　　T1組的內(nèi)膜厚度為4.64±0.7μm；T2組內(nèi)膜厚度開始有所下降1.46±0.3μm，與T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T3組開始內(nèi)膜厚度持續(xù)上升，T3組3.40±0.3μm，T4組內(nèi)膜厚度達18.2±2.6μm；T1組的中膜+外膜厚度為6.3±0.8μm；術后持續(xù)升高。T2組8.3±1.3μm，T3組15.7

3、±1.8μm，T4組45.8±5.1μm，均高于T1組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Western Blot示：T1組PCNA目的條帶與內(nèi)參條帶灰度百分比為(40.4±2.6)％；T2組百分比為(36.4±5.2)%，較 T1組低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；隨后比值開始上升，T3組百分比為(43.6±4.3)%，較T1組稍高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；于T4組達到最高峰(78.0±7.3)%，明顯高于T1組，差異有

4、統(tǒng)計學意義(P<0.05)；之后比值緩慢下降。TUNEL法示：T1組中凋亡細胞表達量極低，為(1.46±0.3)%，但在T2組凋亡表達即達高峰18.06±1.8)%，與 T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T3組下降較快，為7.26±0.5)%，與T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T4組凋亡降至術后最低水平(2.05±0.6)%，與T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；之后凋亡維持在較低水平。免疫組化示：T1組P

5、CNA陽性細胞百分比為(6.03±1.0)%；T2組有所下降(5.01±0.9)%，與T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T3組開始比值開始增高(11.29±1.4)%，與T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；于T4組達到最高峰31.5±3.2)%，與 T1組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；之后百分比逐漸下降。基因芯片檢測分析發(fā)現(xiàn)，sesn1基因在靜脈移植術后比正常靜脈表達量低，尤其是術后第1天凋亡高峰期時表達量更低