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文檔簡介
1、目的:建立妊娠瘧疾的小鼠動物模型,初步觀察妊娠期孕鼠感染瘧原蟲對子代鼠生長發(fā)育以及細胞免疫功能的影響;并初步研究胚胎期暴露瘧原蟲抗原對子代鼠易感性的影響;從而加深對妊娠瘧疾致病機制的認識和理解。
方法:(1)選用清潔級成年昆明鼠合籠交配確定受孕,孕鼠在妊娠第7天、第14天、第16天分別腹腔接種伯氏瘧原蟲的6個不同劑量,觀察孕鼠流產例數。(2)孕鼠妊娠第14天,腹腔接種伯氏瘧原蟲1×106個/只作為實驗組,接種相同體積生理鹽水作
2、為對照組,飼養(yǎng)孕鼠到自然分娩。觀察兩組子代新生鼠的出生體重、產仔數等生理指標,并取其尾血制作血涂片。分別于子代新生鼠出生后第0、1、3、5天,解剖分離胸腺、脾臟,制備單細胞懸液,流式細胞儀檢測觀察其胸腺、脾臟中CD4/CD8 T細胞亞群的變化;(3)待兩組子代新生鼠生長至4周,再次觀察胎鼠期P.b暴露4周齡子代鼠的體重等生理指標以及其胸腺、脾臟中CD4/CD8 T細胞亞群的變化;(4)給予兩組4周齡子代鼠腹腔接種伯氏瘧原蟲1×106個/
3、只,觀察兩組子代鼠紅細胞感染率、存活時間以及子代鼠脾臟細胞對P.b抗原刺激的增殖反應。
結果:(1)孕鼠流產的情況隨接種時間和劑量的不同出現明顯變化。其中在妊娠第14天感染組孕鼠流產例數顯著低于第7天組(P<0.05),而顯著高于第16天組(P<0.05)。妊娠第14天接種不同劑量的各組中,接種劑量為1×106個組的孕鼠流產例數明顯低于8×106個組(P<0.05),而與其它劑量組相比無顯著差異(P>0.05)。(2)實驗組子
4、代新生鼠的血涂片結果陰性,但其出生體重和存活個數顯著低于對照組(P<0.05)。在子代新生鼠出生后第0、1、3、5天,實驗組子代新生鼠胸腺、脾臟中 CD3+CD4+CD8-T細胞的比例均顯著高于對照組(P<0.05),而 CD3+CD4-CD8+T細胞的比例在胸腺中均顯著低于對照組(P<0.05),在脾臟中與對照組相比無顯著差異(P>0.05)。(3)胎鼠期P.b暴露4周齡子代鼠體重顯著低于P.b未暴露組(P<0.05)。其胸腺、脾臟中
5、CD3+CD4+CD8-T細胞的比例顯著高于P.b未暴露組(P<0.05)而 CD3+CD4-CD8+T細胞的比例顯著低于 P.b未暴露組(P<0.05)。(4)兩組4周齡子代鼠腹腔接種伯氏瘧原蟲后,P.b暴露組子代鼠存活時間顯著短于P.b未暴露組(P<0.05)。連續(xù)觀察7天,紅細胞感染率P.b暴露組顯著高于P.b未暴露組(P<0.01)。觀察接種后第3天 P.b暴露組子代鼠胸腺、脾臟中的CD3+CD4+CD8-T細胞的比例顯著高于P
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