馬鞭石斛黃酮提取工藝優(yōu)化及抗氧化活性研究.pdf

1、隨著生活水平的提升，人們對(duì)現(xiàn)代園林景觀的功能有了更多的要求，除了傳統(tǒng)的游憩、觀賞的功能外，園林更是擔(dān)負(fù)著維護(hù)公共健康的責(zé)任。從保健型園林的構(gòu)建到“園藝療法”的興起，這些都反映了人們?cè)谶M(jìn)行園林創(chuàng)建的時(shí)候已把人們的身體和心理需求放在了同等重要的地位，作為構(gòu)建養(yǎng)生保健型園林的基礎(chǔ)，具有保健作用的園林植物引起了人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。
　　石斛屬是蘭科中的一個(gè)大屬，因其花色艷麗多彩，姿態(tài)優(yōu)美，花期長(zhǎng)，并且耐插耐貯，在園林中已得到廣泛應(yīng)用。除具

2、有重要的觀賞價(jià)值以外，石斛還具有多種保健作用，因而被人們稱作神仙草，在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品而常常作為藥用。馬鞭石斛是《中國(guó)藥典》（2005版）明確收錄的五種藥用石斛之一，其藥用價(jià)值更為突出。然而人們對(duì)其重要的次生代謝產(chǎn)物黃酮的開發(fā)利用還處于起步階段。因此，對(duì)馬鞭石斛黃酮進(jìn)行提取工藝及活性的研究具有重要的意義。
　　本文主要對(duì)馬鞭石斛黃酮的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并初步探討其純化工藝及其體外抗氧化活性。本實(shí)驗(yàn)采用溶劑回流法提取黃酮，

3、單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明提取溫度，料液比和乙醇濃度對(duì)黃酮的提取有顯著的影響。通過(guò)效應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化，得到了最優(yōu)化的提取條件為:提取溫度87℃，料液比34∶1，乙醇濃度73％。在這個(gè)最優(yōu)條件下計(jì)算得到的期望提取率為4.63mg/g。在最優(yōu)條件的驗(yàn)證試驗(yàn)中得到的實(shí)際黃酮平均提取率為4.52±0.02mg/g，這和預(yù)期的4.63mg/g相吻合。
　　對(duì)馬鞭石斛黃酮粗提物進(jìn)行還原性測(cè)定，清除DPPH自由基的測(cè)定，清除ABTS自由基的測(cè)定和清除羥自由

4、基的測(cè)定。結(jié)果顯示，黃酮粗提物對(duì)ABTS和DPPH自由基的清除效果是明顯的。當(dāng)黃酮樣品的濃度達(dá)到0.8mg/mL時(shí)，對(duì)ABTS的清除率能夠達(dá)到100％。當(dāng)樣品濃度達(dá)到6.4mg/mL時(shí)，對(duì)DPPH的清除率能達(dá)到84.56％。當(dāng)濃度為6.4mg/mL時(shí)其還原性能達(dá)到1.25，對(duì)羥自由基的清除率為51.05％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示馬鞭石斛黃酮具有較好的體外抗氧化活性。
　　用AB-8大孔樹脂對(duì)馬鞭石斛黃酮的粗提物進(jìn)行初步純化，分別用蒸餾水、8

5、0％的乙醇進(jìn)行洗脫，最后收集洗脫液，將洗脫液真空烘干得到經(jīng)初步純化后的馬鞭石斛黃酮樣品。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)純化后馬鞭石斛黃酮的純度提高了6.44％，這說(shuō)明大孔樹脂對(duì)馬鞭石斛黃酮的純化具有明顯的效果。
　　對(duì)經(jīng)初步純化后的黃酮樣品進(jìn)行抗氧化活性測(cè)定，結(jié)果顯示其體外抗氧化活性顯著增強(qiáng)。當(dāng)濃度為6.4mg/mL時(shí)其還原性能達(dá)到1.975。當(dāng)樣品濃度達(dá)到0.4mg/mL時(shí)，其對(duì)ABTS自由基的清除率即能達(dá)到100％，與純化前相比其清除能力顯著增強(qiáng)。