桑枝黃酮提取分離及抗氧化活性研究.pdf

1、桑樹(shù)為灌木或落葉喬木，桑屬植物體的各個(gè)部分在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)上均可入藥，歷代中國(guó)藥典均收載了桑葉、桑枝、桑白皮、桑椹的藥用功效。
　　 桑枝含有很多生物活性物質(zhì)，如黃酮、生物堿、甾體、香豆素、二苯乙烯、萜類(lèi)化合物等。其中黃酮類(lèi)化合物具有抗氧化、抗突變、抗衰老、抗腫瘤等廣泛的生物活性，但尚未得到有效利用。本文以桑枝為原料，對(duì)桑枝黃酮的提取分離純化及抗氧化活性方面作了較為系統(tǒng)的研究，主要研究?jī)?nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.桑枝總黃酮

2、提取工藝研究
　　 本實(shí)驗(yàn)探討了提取時(shí)間、乙醇濃度、料液質(zhì)量濃度及溫度對(duì)桑枝總黃酮提取效果的影響，在此基礎(chǔ)上利用正交試驗(yàn)，采用極差和方差分析法確定了黃酮的最佳提取工藝條件：溫度為80℃、料液質(zhì)量濃度33g/L、乙醇濃度70％、浸提時(shí)間120min。在該條件下，其提取率可達(dá)1.01％。
　　 2.桑枝總黃酮的分離純化研究
　　 本試驗(yàn)探討了聚酰胺分離純化桑枝總黃酮的靜態(tài)吸附和動(dòng)態(tài)吸附兩方面的技術(shù)參數(shù)，靜態(tài)吸附上樣量

3、1:274g/g(凈黃酮量：樹(shù)脂量)、動(dòng)態(tài)吸附上樣量1:61g/g、上樣濃度2.149mg/mL、吸附流速和解析流速均為1mL/min、吸附時(shí)間1h、70％乙醇作為洗脫劑。在此條件下黃酮的洗脫量可達(dá)92.29％。
　　 3.桑枝中桑色素的分離純化及檢測(cè)
　　 采用95％乙醇浸提，乙酸乙酯萃取，聚酰胺樹(shù)脂吸附色譜法對(duì)桑色素進(jìn)行分離純化。結(jié)果表明，該方法可提取分離到高純度的桑色素。薄層層析色譜法顯示，以氯仿：甲醇：醋酸(15

4、:5:2)作為展開(kāi)劑，用1％硝酸鋁醇溶液顯色，可于波長(zhǎng)為365nm的紫外燈下觀察到桑色素顯綠色熒光。用高效液相色譜作定性檢測(cè)，結(jié)果表明，用symmetry()C-18(4.6×150mm)色譜柱，以甲醇：水：磷酸(50:49.8:0.2)為流動(dòng)相，流速為1mL/min，柱溫30℃，在波長(zhǎng)370nm處桑色素具有良好的色譜吸收峰。
　　 4.體外抗氧化活性研究
　　 本試驗(yàn)以VE做對(duì)照，從清除自由基能力和還原能力兩方面評(píng)價(jià)了

5、蘆丁、槲皮素、桑色素和桑枝總黃酮抗氧化能力。結(jié)果表明，槲皮素對(duì)DPPH·的清除能力最強(qiáng)，是VE的1.4倍，桑色素和桑枝總黃酮的清除能力相近且弱于槲皮素，蘆丁清除能力最弱；在0.02-0.08mg/mL范圍內(nèi)，槲皮素的還原能力最強(qiáng)，桑色素和桑枝總黃酮與VE的還原能力相近，且弱于槲皮素，蘆丁的還原能力最弱。
　　 5.不同品種桑枝總黃酮含量比較
　　 本試驗(yàn)對(duì)本校桑樹(shù)種質(zhì)資源圃中保存的幾種生產(chǎn)上廣泛種植的栽培品種的桑枝總黃酮