間期FISH臨床檢測BCR-ABL融合基因的研究.pdf

1、目錄中文摘要：3論文正文：間期FISH臨床檢測BCR／ABL融合基因的研究5第一部分：熒光原位雜交技術(shù)平臺的建立6材料與方法：6實驗結(jié)果：12討論：一17第二部分：間期FISH臨床檢測BCR／ABL融合基因20材料與方法：20實驗結(jié)果：21討論：24第三部分：臨床檢測BCR／ABL融合基因的方法比較及意義26材料與方法：26實驗結(jié)果：34討論：39全文總結(jié)：42參考文獻：43英文摘要：46致謝：49縮略詞表：51獨創(chuàng)性聲明：51綜述：5

2、222195份臨床診斷為CML或疑似CML的骨髓或外周血標本，以第1部分實驗驗證為評分標準，195例樣本中129例樣本檢測為陽性，占661％，其中典型的陽性信號模式1G1R2F，樣本92例，占陽性比例7l。3％，非典型陽性信號模式37例，占287％，與有類似文獻報道接近，檢測出的各非典型的信號模式有1G1R1F、2G2R1F、1G2F、2G1R1F、1G2R1F、2G3R1F，1G1R3F。3對來自6名確診CML患者格列衛(wèi)或骨髓移植治療

3、前后的26份骨髓樣本用三種方法進行了檢測結(jié)果見表6實驗結(jié)論1FISH技術(shù)方法驗證一般分為四個步驟，A熟悉實驗操作；B前期驗證實驗包括內(nèi)容有組織類型、信號模式解釋、分析的細胞數(shù)和方法的敏感度、每一個信號模式的CUTOFF值；C臨床評價其內(nèi)容包括首先是對前期驗證實驗建立的CUTOFF值進行評估；通過檢測異常樣本建立異常參考范圍；解釋各信號模式與金標準相關(guān)性；編寫標準操作手冊；實驗的靈敏度或特異性；D精密度評價。總之，驗證要求遵從標準規(guī)則，因

4、此，在其使用在臨床實驗之前，驗證該實驗符合性，安全生，準確阻這一系列的程序是很重要的。2間期FISH技術(shù)可以明顯提高染色體異常的檢出率及準確率，且其方法穩(wěn)定?？梢詸z測出所有形式的Ph染色體，對于一些次要斷裂點形成BcR／ABL轉(zhuǎn)錄本RTPCR無法檢測到，間期雙色雙融合FISH可以檢測出，F(xiàn)ISH可應(yīng)用于CML異基因造血干細胞移植后MRD的監(jiān)測，以及伊馬替尼治療的療效觀察。其操作簡易快速，靈敏度高，且骨髓或外周血均可采用。動態(tài)監(jiān)測能及時發(fā)

5、現(xiàn)擴大的白血病細胞克隆。是一種很有價值確診，預(yù)后判斷以及療效觀察有效手段。3本研究中最適用在本中心開展且穩(wěn)定的是FISH技術(shù)，其余兩種方法穩(wěn)定性，靈敏度，標本運輸送檢的流程上均需要進一步提高，而且本研究指出FISH檢測與RTPCR有很好的相關(guān)性，因此在本中心臨床標本檢測中，不管患者是處在疾病的何種時期，建議均需應(yīng)用FISH技術(shù)檢測BCR／ABL融合狀態(tài)。在三種技術(shù)方法均正確穩(wěn)定可靠的情況下可采用表7m]CML患者進行遺傳檢測的策略。長鑲