鹽酸二甲雙胍的衍生化測(cè)定及其機(jī)理研究.pdf

1、糖尿病是一種嚴(yán)重危害人體健康的常見慢性終身疾病，鹽酸二甲雙胍作為糖尿病的治療藥物，現(xiàn)已成為輕、中度Ⅱ型糖尿病患者特別是肥胖患者的首選治療藥。因此，建立準(zhǔn)確度高、選擇性好、檢測(cè)限低、靈敏度高的檢測(cè)方法將對(duì)人類醫(yī)學(xué)研究有深刻意義。然而由于鹽酸二甲雙胍紫外吸收不明顯，導(dǎo)致直接測(cè)定時(shí)靈敏度較低。本論文首次采用對(duì)氯苯甲酰氯為衍生化試劑，對(duì)鹽酸二甲雙胍進(jìn)行柱前衍生化反應(yīng)，通過實(shí)驗(yàn)，得到最佳實(shí)驗(yàn)條件為：檢測(cè)波長249.0nm；最佳流動(dòng)相甲醇：緩沖(K

2、H<,2>PO<,4>+H<,3>PO<,4>，pH=4)=80:20；流速0.8mL/min；柱溫25℃；進(jìn)樣量20μL；最佳溶劑為二氯甲烷；最佳氫氧化鈉濃度為2.5mol/L；最佳反應(yīng)時(shí)間為60min；最佳投料比為4∶1；反應(yīng)溫度為室溫。在以上最佳實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為0.0050mg/L～50.0 mg/L，最小檢測(cè)濃度為5.0μg/L，三種不同濃度二甲雙胍標(biāo)準(zhǔn)液0.20mg/L、5.0 mg/L、20.0 mg/L

3、日內(nèi)精密度和日間精密度RSD分別為2.81％、0.92％、0.47％和3.54％、3.32％、1.41％。該三種濃度下的回收率分別為98.5％～103.3％、96.13％～102.9％、93.93％～96.38％。 通過以上研究發(fā)現(xiàn)，鹽酸二甲雙胍通過衍生化后，有明顯的紫外特征吸收。本論文采用柱層析色譜分離法提純衍生化產(chǎn)物，對(duì)提純物進(jìn)行紫外光譜法、紅外光譜法、核磁共振法及質(zhì)譜法鑒定，確定了鹽酸二甲雙胍衍生化產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)，并在此基礎(chǔ)上

4、研究確定了其衍生化機(jī)理。從產(chǎn)物結(jié)構(gòu)來看，該衍生化反應(yīng)與普通的氨基化合物衍生化反應(yīng)有明顯的不同，反應(yīng)過程中鹽酸二甲雙胍的主結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，成為環(huán)狀，生成2-氨基-4-二甲氨基-6-對(duì)氯苯基-1，3，5三嗪。 最后，本論文將該衍生化方法引入模擬血液樣品，測(cè)定其中的鹽酸二甲雙胍含量。經(jīng)對(duì)比得出血樣的最佳前處理方法。模擬樣品工作曲線的一元線性回歸方程為：y=11.511x-0.1239，線性回歸系數(shù)r=0.9985，線性范圍為1.0mg