褐藻多糖硫酸酯對腺嘌呤致大鼠腎間質(zhì)纖維化的作用及其機制探討.pdf

1、褐藻多糖硫酸酯對腺嘌呤致大鼠腎間質(zhì)纖維化的作用及其機制探討。背景與目的:腎間質(zhì)纖維化是慢性腎功能衰竭(CRF)的共同途徑，而腎小管上皮細胞間充質(zhì)細胞轉(zhuǎn)化(epithelia-mesenchymal transition，EMT)則是腎間質(zhì)纖維化的主要途徑之一。國內(nèi)外少量研究提示，褐藻多糖硫酸酯(fucoidan polysaccharide sulfate，F(xiàn)PS)在改善腎血流及減少尿蛋白等方面有一定作用，但對腎小管上皮細胞EMT的作用

2、如何，尚未見報告。本研究旨在觀察FPS對腺嘌呤致大鼠慢性腎衰模型的腎小管上皮細胞EMT以及腎間質(zhì)纖維化的作用。 方法:將6周齡Wistar雄性大鼠隨機分為3組，即：1.正常對照組(n=15)，2.CRF模型組(n=24)，3.CRF+FPS治療組(n=24)。第1組進食普通飼料；第2組進食含0.75％腺嘌呤的飼料，持續(xù)喂養(yǎng)6周；第3組在進食含0.75％腺嘌呤飼料的同時每天給予FPS 200mg/kg體重灌胃，持續(xù)6周。分別于第2

3、、4、6周末收集大鼠24小時尿液，留取血標本；并處死大鼠，留取腎組織。應用自動分析儀測定血肌酐、白蛋白和24小時尿蛋白；Masson染色切片分析腎間質(zhì)纖維化程度；免疫組化方法半定量分析腎組織中α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、E鈣粘素(E-cadherin)、單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β<,1>)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血小板反應蛋白1(TSP-1)的表達；蛋白印跡法(Western Blot)檢測

4、。腎皮質(zhì)α-SMA，VEGF蛋白的表達強度；用逆轉(zhuǎn)錄酶PCR法(RT-PCR)檢測腎皮質(zhì)MCP-1、TGF-β<,1>、TSP-1和VEGF的mRNA表達。 結(jié)果:(1)CRF+FPS治療組大鼠2、4、6周末24小時尿蛋白均明顯低于同期CRF模型組(P<0.05)；但兩組間血肌酐水平?jīng)]有顯著性差異(P>0.05)。(2)CRF+FPS治療組大鼠MASSON染色陽性面積百分比2、4、6周均明顯低于同期CRF模型組(P<0.01)，

5、腎間質(zhì)纖維化程度明顯減輕。(3)CRF+FPS治療組腎組織α-SMA蛋白表達2、4、6周均明顯低于同期CRF模型組(P<0.05)。(4)CRF+FPS治療組腎組織VEGF蛋白和mRNA表達2、4周明顯高于同期CRF模型組(P<0.05)。(5)CRF+FPS治療組大鼠腎組織TSP-1蛋白表達2、4周時明顯低于同期CRF模型組(P<0.05)，mRNA表達2周時明顯低于同期CRF模型組(P<0.05)。(6)CRF+FPS治療組大鼠腎組

6、織MCP-1表達2、4周均明顯低于同期CRF模型組(P<0.05)。(7)CRF+FPS治療組大鼠腎組織免疫組化法TGF-β<,1>表達2、4周時明顯低于同期CRF模型組(P<0.05)，mRNA表達2周時明顯低于同期CRF模型(P<0.05)。 結(jié)論: FPS治療可以減少腺嘌呤致腎衰大鼠的尿蛋白排泄，減輕腎間質(zhì)纖維化程度；其機制可能與FPS抑制腎小管上皮細胞EMT，下調(diào)腎組織MCP-1、TGF-β<,1>和TSP-1的表達及上