常用神經毀損藥物局部注射對大鼠坐骨神經形態(tài)學及功能的影響.pdf

1、目的：疼痛是組織損傷或與潛在的組織損傷相關的一種不愉快的軀體感覺和情感經歷，同時可伴有代謝、內分泌、呼吸、循環(huán)及心理學的改變。目前用于治療慢性疼痛的藥物和方法很多，但由于疼痛常涉及人體多個系統，人們對疼痛性疾病的發(fā)病機理及止痛藥物作用機制的認識還遠遠不足，難以完全保證神經毀損藥的療效及應用的安全性。本實驗將臨床上常用的幾種神經毀損藥物注射于鼠的坐骨神經周圍或神經鞘內，選取不同的時間點觀察坐骨神經的形態(tài)學及超微結構的變化，并測定鼠坐骨神經

2、傳導速度，從而進一步明確常用神經毀損藥物的作用機理，為臨床上更為合理的選擇神經毀損藥物提供理論依據。 方法： 1.動物選擇與分組：取鼠齡為5-6周的成年雄性SD大鼠105只，體重350-380g。隨機分為7組，每組15只：正常對照組(A組)、阿霉素組(B組)、無水乙醇組(C組)、8％酚甘油組(D組)、10％酚甘油組(E組)、12％酚甘油組(F組)、慶大霉素組(G組)。每個組再隨機分為術后7、14、21d 3個亞組，每亞組

3、5只，分別取材觀察。 2.手術及注射方法：腹腔注射水和氯醛350mg/kg麻醉后，無菌條件下作臀部斜切口，在手術顯微鏡下于臀肌間隙顯露雙側坐骨神經，選擇坐骨神經穿入半膜肌處注射。用30G針頭穿刺，左側坐骨神經鞘內注射不同藥液0.02ml(A組注入0.9％生理鹽水；B組注入阿霉素5mg/ml；C組注入無水乙醇；D組注入8％酚甘油；E組注入10％酚甘油；F組注入12％酚甘油；G組注入慶大霉素800U；右側坐骨神經神經周圍注射相同藥液

4、0.2ml。用可吸收縫線縫合切口。 3.觀察指標：(1)神經表面大體觀察：各亞組分別于取材前肉眼觀察神經外觀變化；(2)運動功能大體觀察：注射后觀察各組大鼠的后肢運動功能；(3)組織學觀察：各亞組分別于術后7d、14d、21d，取注射點上、下各10mm的坐骨神經，分別做HE染色和嗜銀染色，觀測神經橫切面軸突數目、密度，以及髓鞘的改變；(4)電鏡觀察：各亞組分別于術后7d、14d、21d取材后電鏡下觀察神經軸突及髓鞘超微結構的改變；(5)

5、神經傳導速度的測定：21d亞組麻醉后暴露雙側坐骨神經，記錄復合肌肉動作電位波幅，潛伏期，計算出運動神經傳導速度。 4.統計學處理：所有計量資料均用均數±標準差表示，計量資料自身前后比較采用配對t檢驗，組間比較采用方差分析法。采用SPSS12.0統計軟件進行處理，P<0.05為差異有統計學意義。 結果： 1、大鼠及大鼠坐骨神經的大體觀察：用藥后7d，A組坐骨神經呈銀白色、光滑，與周圍組織無粘連，周圍組織無充血水腫。

6、其余各組均出現不同程度的改變，其中B組光澤度較A組差；D組、E組、F組、C組坐骨神經的顏色依次加重，由淺黃色到黃褐色，且均與周圍組織有粘連；G組與B組相似，但粘連較重。14d較7d時均稍有加重，21d時B組、C組、G組較14d時無明顯改變，D組、E組、F組較14d有所加重。 2、A組術后24h雙后肢活動無障礙；其余各組均出現運動功能障礙，其中B組約36h恢復，其他組約于術后72h恢復運動功能。 3、組織學變化用藥后7d，A組雙側

7、坐骨神經纖維均排列規(guī)則。B組右側神經外膜血管充血，神經纖維髓鞘輕度腫脹，少許神經纖維髓鞘空泡化；兩側相似。C組右側絕大部分神經束中的神經纖維髓鞘空泡化，軸索消失或變性，炎細胞浸潤，同時伴有灶性出血、壞死，個別神經束雪旺氏細胞增生顯著；左側全部神經束的神經纖維髓鞘空泡化，其余與右側相似。D組病理改變與B組相似，程度較重。E組與D組相似，但靠近束膜部有雪旺氏細胞增生。F組與E組相似，程度更重。G組可見炎性細胞浸潤。用藥后14d，A組較前無明

8、顯改變。B組部分神經纖維髓鞘腫脹較前加重。C組較7d時，雪旺氏細胞增多，余無明顯改變。D組、E組、F組軸索的變性以及雪旺氏細胞的增生均較前加重，G組神經纖維間的炎性反應較前明顯減輕，其余無明顯改變。用藥后21d，A、B組大鼠較前無明顯改變。C組較14d時，雪旺氏細胞增生更加明顯。D組、E組、F組雪旺氏細胞較前增多，且隨著酚甘油濃度的增加，雪旺氏細胞增生也更加明顯。G組神經纖維間無明顯慢性炎性反應。 4、超微結構變化用藥后7d，A

9、組雙側髓鞘厚薄均勻，形態(tài)規(guī)則，半側結構排列整齊，線粒體脊和膜分界清晰。B組右側神經髓鞘輕微增生，輕微不整形，板層狀結構模糊不清，線粒體大部分膜和脊界限模糊不清，微絲、微管數量減少。左側神經髓鞘輕度增生，有分層顯像，其他基本正常。C組左側髓鞘厚薄不均，形態(tài)不規(guī)則，部分板層結構排列紊亂，有分層現象，板層結構外凸內凹，軸索線粒體大部分脊和膜融合，模糊不清，部分線粒體空泡化，微絲、微管數量減少。右側與左側相似。D組與C組變化一致，程度明顯減輕，

10、兩側相似。E組重于D組。F組重于E組。G組變化與B祖相似。用藥后14d，A、B、C、G組較7d時無明顯改變。D組、E組、F組可見髓鞘的增生，線粒體脊和膜的融合均較前加重。用藥后21d，各組較14d時無明顯改變。 5、神經傳導速度用藥后21d，各組神經傳導速度和復合動作電位波幅均明顯低于對照組，但潛伏期明顯高于對照組；阿霉素鞘外組潛伏期明顯短于鞘內組及其余各組(P<0.05或0.01)，動作電位波幅明顯高于鞘內組及其余各組(P<0.05或

11、0.01)；無水乙醇鞘外組及12％酚甘油鞘外組波幅明顯低于其余各組(P<0.01)，而無水乙醇鞘內組及12％酚甘油組的潛伏期明顯長于其余各組(P<0.01)；運動神經傳導速度除無水乙醇鞘外組及12％酚甘油鞘外組明顯降低外(P<0.05)，其余各組差異無統計學意義。 結論：神經毀損藥物阿霉素局部刺激性小、對運動功能影響??；無水乙醇、酚甘油局部刺激性較大，酚甘油對神經毀損的程度及對運動功能的影響隨濃度增加而加重；慶大霉素對局部組織刺