小窩蛋白-1在食管癌轉(zhuǎn)移中的作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、研究目的：
　　在細(xì)胞學(xué)水平檢測(cè)小窩蛋白-1在食管癌轉(zhuǎn)移中的作用并初步探索Cav-1與Rho/ROCK信號(hào)通路在食管癌進(jìn)展中的相互作用。
　　研究方法：
　　1、用含10％胎牛血清，1%青霉素和1%鏈霉素的高糖 DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人食管癌細(xì)胞株EC109、ECa109、TE1、TE13。
　　2、Western blot方法檢測(cè)細(xì)胞株中Cav-1、pY14Cav-1的表達(dá)水平。
　　3、劃痕試驗(yàn)檢測(cè)四株細(xì)胞

2、的遷移能力。
　　4、Cav-1 siRNA轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞株（EC109、TE1、TE13），轉(zhuǎn)染試驗(yàn)分為Cav-1 siRNA1組， Cav-1 siRNA2組，陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組；Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染Cav-1 siRNA的效果。
　　5、ROCK抑制劑Y-27632以不同濃度作用于食管癌細(xì)胞（EC109、ECa109、TE1、TE13）同時(shí)篩選最佳作用濃度。
　　6、Transwell方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染

3、前后及藥物作用前后細(xì)胞遷移、侵襲能力的變化。
　　結(jié)果：
　　1、Cav-1在食管癌細(xì)胞株（EC109、ECa109、TE1、TE13）中均有表達(dá)，其表達(dá)水平不一。pY14Cav-1僅在細(xì)胞株TE1、TE13中表達(dá)。
　　2、劃痕試驗(yàn)結(jié)果顯示表達(dá) pY14Cav-1的細(xì)胞株 TE1、TE13的遷移能力明顯強(qiáng)于不表pY14Cav-1的細(xì)胞株EC109、ECa109。
　　3、轉(zhuǎn)染Cav-1 siRNA使細(xì)胞株中Ca

4、v-1表達(dá)水平降低后，細(xì)胞遷移、侵襲能力隨之降低。4、ROCK抑制劑Y-27632以10umol/L濃度作用于細(xì)胞1小時(shí)，細(xì)胞EC109、ECa109中Cav-1表達(dá)水平降低，細(xì)胞遷移、侵襲能力同時(shí)降低。Y-27632對(duì)細(xì)胞中Cav-1表達(dá)水平的降低及細(xì)胞遷移、侵襲能力的抑制并不呈濃度依賴。
　　結(jié)論：
　　1、在EC109、ECa109、TE1和TE13四株細(xì)胞中， Cav-1的表達(dá)水平和細(xì)胞的分化程度無關(guān)。
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