普萘洛爾對人肺腺癌A549細胞VEGF表達影響的實驗研究.pdf

1、目的:
　　探討非選擇性β-受體阻滯劑-鹽酸普萘洛爾(propranolol)對人肺腺癌細胞(lungadenocarcinoma cells，LAC)血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表達情況的影響作用，揭示非選擇性β-受體阻滯劑抑制肺腺癌血管生成的機理，旨在為普萘洛爾在抗腫瘤血管治療方面提供理論和實驗依據(jù)。
　　方法:
　　把呈對數(shù)期生長且生長狀態(tài)良好

2、的肺腺癌A549細胞挑選出來，將其接種在6孔細胞培養(yǎng)板上進行培養(yǎng)，定時更換細胞培養(yǎng)液，采用隨機分組的原則將其分為實驗組和空白對照組。倒置顯微鏡下觀察細胞的生長狀態(tài)，待觀察到細胞貼壁達到80％以上時，吸凈6孔板中的培養(yǎng)液，實驗組的每孔中分別加入2ml不同濃度(1、2、4、8、16 ug/ml)的普萘洛爾，空白對照組的孔中加入同等體積的培養(yǎng)液(普萘洛爾濃度為0 ug/ml)，置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。孵育24小時后，采用免疫組織化學(xué)的方法對肺腺

3、癌A549細胞VEGF的表達進行測定，檢測用藥前后實驗組和空白對照組中肺腺癌A549細胞VEGF蛋白的表達情況。
　　結(jié)果:
　　(1)實驗組和空白對照組中，肺腺癌A549細胞均存在VEGF的表達，其蛋白陽性信號主要見于細胞核的核膜周圍和胞質(zhì)內(nèi)。
　　(2)與空白對照組相比，經(jīng)過普萘洛爾處理后，實驗組中肺腺癌A549細胞VEGF的蛋白表達均減弱，其蛋白陽性信號降低，但其表達位置未見改變。
　　結(jié)論:
　　(

4、1)肺腺癌A549細胞接種后3～5天呈對數(shù)生長，之后進入生長平臺期，最后，細胞的生長速度減慢。給予藥物處理后，細胞的生長速度明顯降低，大量細胞進入凋亡狀態(tài)。
　　(2)肺腺癌A549細胞的血管內(nèi)皮細胞膜上普遍存在VEGF受體。VEGF可以在組織內(nèi)激活ERK/MAPK通路，從而促進血管的生成。
　　(3)普萘洛爾對VEGF蛋白表達陽性的細胞和強陽性的細胞均有殺傷作用，可以抑制肺腺癌A549細胞VEGF蛋白的表達。
　　(