茶多酚對人肺腺癌A549細胞的影響及機制探討.pdf

1、目的:
　　1.探討茶多酚對人肺腺癌A549細胞株增殖、侵襲、粘附的影響。
　　2.研究茶多酚對A549細胞survivin基因及P53基因表達的作用。
　　3.研究茶多酚對A549細胞血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)產(chǎn)生的影響。
　　方法:
　　1.體外液體培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞。
　　2.應(yīng)用MTT法測定不同濃度茶多酚對A549細胞增殖的影響。
　　3.使用Transwell侵襲實驗檢測茶多酚

2、對A549細胞浸潤的影響。
　　4.采用粘附實驗檢測茶多酚對A549細胞粘附的影響。
　　5.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)研究茶多酚對A549細胞survivin及P53的mRNA表達的變化。
　　6.ELISA法測定培養(yǎng)上清液中的VEGF含量變化，探討茶多酚對A549細胞產(chǎn)生VEGF的作用。
　　結(jié)果:
　　1.茶多酚對細胞增殖活性的影響:與正常對照組比較，50、100、150、200、250、300μg/ml茶

3、多酚組顯著抑制A549細胞增殖，且呈濃度依賴性，其OD值均顯著降低(P＜0.01);IC50為203.75μg/ml;除250μg/ml組和300μ g/ml之間以外，各濃度組之間P＜0.05。
　　2.與對照組相比，50、100、150、200μ g/ml的茶多酚顯著降低A549細胞的侵襲力(P＜0.05)。四個濃度組之間的侵襲細胞數(shù)的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，并且侵襲細胞數(shù)隨著茶多酚濃度的提高呈逐漸減少。
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4、.與對照組相比，50、100、150、200μg/ml茶多酚顯著降低A549細胞的粘附于體外仿真基底膜的能力(P＜0.01)，且粘附細胞數(shù)隨著茶多酚濃度的提高而減少。
　　4.與正常對照組比較，50、100、150、200μg/ml茶多酚顯著減少A549細胞的survivin基因表達(P＜0.05)，P53基因表達顯著增強(P＜0.05)。
　　5.與對照組相比，50、100、150、200μ g/ml茶多酚顯著減少A549

5、細胞分泌VEGF(P＜0.01)，且隨著茶多酚濃度的提高A549細胞分泌VEGF逐漸減少(P＜0.05)。
　　6.A549細胞增殖抑制率與survivin基因的表達呈高度負相關(guān)(P＜0.01)，與P53基因的表達呈明顯正相關(guān)(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　茶多酚在一定范圍內(nèi)抑制A549細胞的增殖，并與下調(diào)A549細胞survivin基因表達及上調(diào)P53基因成正相關(guān);茶多酚在一定范圍內(nèi)抑制A549細胞的粘附和侵襲力