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文檔簡介
1、目的:探討過氧化物酶體增殖因子活化受體(peroxisomeproliferator-adtivatedreceptorgammar,PPARγ)配體羅格列酮(RosiglitazoneRSG)單獨和與順鉑聯合應用對人肺腺癌A549細胞生長和凋亡的影響,并探討其作用機制。 方法:體外培養(yǎng)人肺腺癌A549細胞,分別或聯合應用不同濃度的羅格列酮、順鉑處理人肺腺癌細胞系(A549)細胞,采用細胞計數法觀測藥物對A549細胞生長曲線的影
2、響,MTT比色法測定藥物細胞生長抑制作用,用流式細胞術、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)熒光雙染法觀察各組細胞凋亡率,并分析細胞周期的變化,以免疫組化法檢測PPARγ、NF-κB、Bcl-2、Bax的表達情況。 結果:(1)MTT比色法結果顯示:50μmol/L以上濃度的羅格列酮可抑制體外培養(yǎng)的A549細胞生長,且呈明顯的濃度-時間依賴方式;1.25、2.5、5.0μmol/L羅格列酮對A549細胞無顯著毒性作用(IR<10%),
3、其與順鉑合用時能增強順鉑對A549細胞增殖抑制作用(q>1.15);與細胞計數繪制生長曲線結果相一致。(2)AO/EB熒光雙染法和流式細胞術結果顯示:羅格列酮能明顯誘導A549細胞凋亡,使細胞周期阻滯于G1期,呈濃度依賴方式;羅格列酮(1.25μmol/L)能促進順鉑(1.96、2.8、4.0mg/L)誘導A549細胞凋亡。(3)免疫組化法結果顯示:人肺腺癌A549細胞表達PPARγ,羅格列酮作用A549細胞后PPARγ蛋白核內表達上調
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