半葉馬尾藻中巖藻聚糖硫酸酯的提取純化及降血脂功能研究.pdf

1、本文對采自廣東湛江硇洲島的半葉馬尾藻，進行了巖藻聚糖硫酸酯提取工藝的優(yōu)化研究。對半葉馬尾藻粗巖藻聚糖硫酸酯進行分離、純化，并研究其抗氧化和降血脂功能活性，為開發(fā)和利用這一資源提供理論依據(jù)。 通過常規(guī)成分分析得出半葉馬尾藻的基本化學組成為：水分11.53％，蛋白質(zhì)7.69％，脂肪1.60％，粗纖維8.95％，灰分16.80％，總碳水化合物53.40％ 以多糖提取率和硫酸基含量為指標，分別討論了溫度、提取時間、加水量及pH值

2、對半葉馬尾藻粗巖藻聚糖硫酸酯提取率和硫酸基含量的影響程度，并根據(jù)L9(34)正交表綜合分析確定最佳提取工藝條件為：pH值1.5，溫度70℃，料液比40及時間6h，在此條件下提取巖藻聚糖硫酸酯得其得率為8.73％，硫酸基含量為13.16％。 研究CaCl2法，乙醇分級沉淀法，CTAB法三種方法對純化的影響，采用DEAEC-52離子交換柱層析對純化后的巖藻聚糖硫酸酯進行分級純化，并對各組分的化學組成進行分析。分析得出CTAB沉淀法進

3、行純化，優(yōu)于乙醇沉淀法和氯化鈣沉淀法。巖藻聚糖硫酸酯經(jīng)DEAEC-52柱層析得F-1，F(xiàn)-2，F(xiàn)-3三個級分，半葉馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯的化學組成為：巖藻糖、糖醛酸、硫酸根和少量蛋白質(zhì)。隨著純度的提高，巖藻糖與硫酸根的含量增加，進而說明巖藻糖與硫酸根為主要組成。 采用薄層層析和紅外光譜對巖藻聚糖硫酸酯的單糖組成和化學結(jié)構(gòu)進行分析得出巖藻聚糖硫酸酯的主要單糖為巖藻糖，半乳糖和葡萄糖醛酸其比例大約為2.5:1：0.5。紅外光譜分析表明

4、，巖藻聚糖硫酸酯中含有有機的硫酸基，巖藻糖和糖醛酸的特征吸收峰，與化學分析相符，通過進一步分析硫酸基可能連接在巖藻糖的C2或C3位上。 采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法和鄰苯三酚自氧化法檢測巖藻聚糖硫酸酯各級分清除超氧陰離子自由基和羥基自由基能力，初步探討抗氧化效果。結(jié)果顯示半葉馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯4個級分SPF、SPF1、F-1、F-2具有顯著的抗氧化能力，其IC50分別為0.078mg/mL、0.135mg/mL、0.08mg/

5、mL、0.111mg/mL，0.157mg/mL、0.238mg/mL0.24mg/mL、0.53mg/mL，且高于抗氧化劑抗壞血酸，并且純度越高抗氧化能力越強，說明巖藻聚糖硫酸酯是主要的活性物質(zhì)。通過建立實驗小鼠高脂血癥模型，探討巖藻聚糖硫酸酯降血脂效果。結(jié)果顯示不同劑量組的半葉馬尾藻巖藻聚糖硫酸酯都具有調(diào)節(jié)血脂的作用，能顯著降低血清總膽固醇(P<0.01)及甘油三酯(P<0.01)及低密度脂蛋白膽固醇(P<0.01)的含量，并可提高