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1、后基因組時代,表達譜基因芯片技術(shù)被廣泛應用。表達譜基因芯片的實驗技術(shù)的研究已經(jīng)成熟,而尋找差異表達基因的統(tǒng)計學方法和表達譜芯片數(shù)據(jù)的生物信息學分析方法雖然有一定的發(fā)展,但是還存在很多的不足。本研究以豬胎盤發(fā)育后期表達譜基因芯片數(shù)據(jù)為研究對象,采用了方差分析法和貝葉斯法兩種方法進行了差異表達基因的篩選,并利用芯片數(shù)據(jù)進行了基因注釋,聚類分析,Pathway分析。本研究的主要結(jié)果如下: 1.運用方差分析法對豬胎盤發(fā)育后期差異表
2、達基因進行了篩選。其中,胎盤發(fā)育75天的二花臉豬(E75)和大白豬(L75)中篩選到胎盤差異表達基因90個,二花臉豬相對大白豬上調(diào)表達的有35個,下調(diào)表達的有55個;胎盤發(fā)育90天的二花臉(E90)和大白豬(L90)中篩選到差異表達基因319個,二花臉豬相對大白豬上調(diào)表達的有135個,下調(diào)表達的有184個。 2.運用貝葉斯方法對豬胎盤發(fā)育后期差異表達基因進行了篩選。E75和L75中篩選到差異表達基因271個,二花臉豬相對大
3、白豬上調(diào)表達的有108個,下調(diào)表達的有163個;E90和L90中篩選到差異表達基因538個,其中二花臉豬相對大白豬上調(diào)表達的有256個,下調(diào)表達的有282個。 3.對兩種統(tǒng)計方法進行了比較研究。將E75和L75組中使用方差分析法篩選到的90個差異表達基因和使用貝葉斯方法篩選到的271個基因進行比較發(fā)現(xiàn),兩種方法都包含的基因有61個。將E90和L90組中使用方差分析法篩選到的319個差異表達基因和使用貝葉斯方法篩選到的538
4、個基因比較發(fā)現(xiàn),兩種方法都包含的基因有247個。 4.差異表達的基因按照分子功能進行分類的結(jié)果顯示,E75和L75組中,主要的類別有細胞生理過程(58.6%),細胞通信(22.5%),信號轉(zhuǎn)導(20%),發(fā)育(16.7%),以及器官生理過程(16.7%)。E90 and L90組中,主要的類別有細胞通信(21.6%),信號轉(zhuǎn)導(19.2%),發(fā)育16.1%),器官生理過程(14.1%),以及生物多聚體修飾(10.2%)。<
5、br> 5.聚類分析結(jié)果顯示不同的發(fā)育時期先聚,然后不同的品種再聚。而基因則分成6個具有相似表達模式的類別。 6.挑選了9個基因?qū)煞N分析方法(方差法和貝葉斯法)進行了Q-PCR驗證。其中,方差分析法分析結(jié)果中有8個基因(ALDH1A1,DIO3,DIRAS3,PON2,ASCL2,WIF1,VEGF,DCN)具有顯著性,SLC38a4沒有顯著性;貝葉斯方法分析結(jié)果中有6個基因(ALDH1A1,DIO3,DIRAS3
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