芪參還五膠囊對糖尿病大鼠海馬神經(jīng)元Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:觀察芪參還五膠囊對糖尿病大鼠海馬神經(jīng)元Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平的干預(yù)作用及對細(xì)胞凋亡的影響，探討芪參還五膠囊對糖尿病中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變可能的作用機(jī)制，為其治療糖尿病腦病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:選取成年雄性健康Wistar大鼠100只，進(jìn)行隨機(jī)分組。實(shí)驗(yàn)設(shè)置四組，分別是:正常對照組(NC組)、糖尿病模型組(DM組)、芪參還五膠囊低劑量治療組（QL組）和芪參還五膠囊高劑量治療組(QH組)，每組25只。
　　1.DM組

2、、QL組和QH組，共75只擬行糖尿病大鼠造模，方法為:禁食12小時后，予腹腔一次性注射1％鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg，72小時后測隨機(jī)血糖≥16.7mmol/1者確定為糖尿病大鼠。其中DM組造模成功21只，QL組造模成功20只，QH組造模成功21只。NC組，禁食12小時，予以等劑量枸櫞酸緩沖液腹腔注射。
　　2.所有大鼠于造模成功后24小時開始灌胃治療，QL組按0.6g/kg.d灌胃，QH組按1.2g/kg.d灌胃。NC組

3、和DM組每日以與中藥治療組等量蒸餾水灌胃，每日一次，共監(jiān)測8周。實(shí)驗(yàn)期間大鼠自由進(jìn)食水，糖尿病大鼠不使用任何降糖藥物。
　　3.灌胃8周后，以3％戊巴比妥40mg/kg腹腔內(nèi)注射麻醉，打開胸腔，左心室采血分離血清，全自動生化分析儀檢測血糖、膽固醇、甘油三酯;再用4℃4％多聚甲醛行心臟灌注固定，灌注完畢斷頭取腦組織，分離各組大鼠海馬組織，固定、包埋，免疫組化法檢測Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平，采用TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡。

4、　　4.計量資料均采用(X)±S表示，各組自身前后比較采用配對t檢驗(yàn)，各組間比較采用單因素方差分析，方差不齊時應(yīng)用對方差進(jìn)行校正的Welch方法，各組間比較采用LSD法或Dunnett T3法，所有數(shù)據(jù)用SPSS19.0軟件統(tǒng)計處理，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1.血糖造模前各組大鼠血糖相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，治療前DM組、QL組及QH組大鼠血糖與NC組相比，均顯著升高(P＜0.01)，造模的各組間血糖

5、比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。經(jīng)灌胃治療8周后，組間血糖相比有顯著性差異(P＜0.01)，QL組、QH組血糖比DM組血糖顯著降低(P＜0.01)，QL組與QH組血糖相比，無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。NC組血糖在治療前后無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，DM組血糖在治療前后無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05), QL組及QH組分別與治療前血糖相比有顯著性差異(P＜0.01)。
　　2.體重造模前各組大鼠體重相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)

6、;治療前造模各組大鼠體重與NC組相比，體重?zé)o顯著性差異(P＞0.05)。經(jīng)灌胃治療8周后，組間體重相比有顯著性差異(P＜0.01)，DM組及QL組、QH組體重相比無顯著性差異(P＞0.05)。NC組體重增長明顯(P＜0.01)，DM組、QL組及QH組分別與治療前體重相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.膽固醇(TCH)經(jīng)灌胃8周后，各組間膽固醇相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　4.甘油三酯(TG)經(jīng)灌胃8周后，各

7、組間甘油三酯相比有顯著性差異(P＜0.01)。QL組、QH組比DM組甘油三酯顯著降低(P＜0.05)，但仍顯著高于NC組(P＜0.01)，QL組與QH組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　5.Bcl-2經(jīng)灌胃治療8周后，各組間Bcl-2表達(dá)相比有顯著性差異(P＜0.01)。DM組、QL組、QH組明顯低于NC組(P＜0.01)，DM組與QL組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)、QL組與QH組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，但QH

8、組與DM組相比，Bcl-2表達(dá)明顯增強(qiáng)(P＜0.05)。
　　6.Bax經(jīng)灌胃8周后，各組間Bax表達(dá)相比有顯著性差異(P＜0.01);DM組、QL組比NS組顯著升高(P＜0.01); QH組比NS組Bax升高(P＜0.05);QH組、QL組與DM組相比Bax表達(dá)顯著降低（P＜0.01），QH組與QL組相比Bax表達(dá)顯著降低(P＜0.01)。
　　7.TUNEL經(jīng)灌胃8周后，各組間海馬凋亡細(xì)胞表達(dá)數(shù)有顯著性差異(P＜0.01

9、);DM組、QL組、QH組比NS組顯著升高(P＜0.01);QH組、QL組與DM組相比顯著降低(P＜0.01)，QH組與QL組相比顯著降低(P＜0.01)
　　結(jié)論:芪參還五膠囊在本實(shí)驗(yàn)中對糖尿病大鼠模型具有作用如下:
　　1.降低糖尿病大鼠血糖。
　　2.顯著提高海馬Bcl-2蛋白表達(dá)水平，降低Bax蛋白表達(dá)水平的作用。
　　3.降低甘油三酯，但對膽固醇無影響。
　　4.對糖尿病大鼠體重?zé)o明顯影響。