高粱抗蚜相關(guān)基因差異表達研究.pdf

1、高粱蚜是高粱的一種主要害蟲，每年對全球的高梁產(chǎn)量和品質(zhì)造成嚴重損失。防治蚜蟲成為我國高粱生產(chǎn)上亟待解決的一個問題。常規(guī)方法選育抗蚜品種已不能滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對抗蚜新品種的需求。隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入和生物技術(shù)的迅猛發(fā)展，利用基因工程技術(shù)結(jié)合傳統(tǒng)育種方法來培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、耐旱、耐鹽、抗病蟲等優(yōu)良性狀的作物新品種已成為研究熱點之一。 本研究利用高粱蚜侵害高粱抗蚜品種河農(nóng)16、感蚜品種千三，用cDNA-AFLP方法研究抗蚜相關(guān)基因的

2、表達，旨在為從分子水平上認識植物抗蚜機理，發(fā)掘并利用抗蚜基因奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下: 1.利用192對AFLP引物組合對河農(nóng)16和千三進行cDNA-AFLP分析，篩選到多態(tài)性引物23對。23對AFLP引物組合在河農(nóng)16中蚜蟲誘導(dǎo)前后無明顯差異；在千三中篩選到84條差異條帶，克隆到23條非重復(fù)性的差異序列。 2.引物組合E36/M51中有一條差異帶在河農(nóng)16中為特異表達，在千三中經(jīng)蚜蟲誘導(dǎo)24小時后表達。 3.

3、與GeneBank中的序列進行同源性分析發(fā)現(xiàn)，千三中的誘導(dǎo)表達差異序列有9種抗蟲相關(guān)基因。其中序列1有194個堿基與水稻的丙二烯氧化物合成酶基因有97％(194/199)的同源性。序列4有298個堿基與水稻脂氧合酶的mRNA序列具有98％(298/304)的同源性。序列6有187個堿基與擬南芥的抗菌蛋白防衛(wèi)素基因有67％(187/278)的同源性。序列8有180個堿基與擬南芥苯丙氨酸解氨酶的mRNA序列具有100％(180/180)的同

4、源性。序列11有292個堿基與小麥PR-1.1蛋白有97％(292/298)的同源性。序列64有67個堿基與棉花銅鋅超氧化物歧化酶的mRNA序列具有100％(67/67)的同源性。序列69有238個堿基與小麥乙醇脫氫酶的mRNA序列具有92％(238/256)的同源性。序列78有168個堿基與玉米的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因有89％(168/187)的同源性。序列81有115個堿基與甘蔗的幾丁酯酶B基因有94％(115/122)的同源性