不同蘿卜抗源抗黑腐病相關(guān)基因差異表達(dá)比較研究.pdf

1、黑腐病是嚴(yán)重影響十字花科蔬菜生產(chǎn)的世界性細(xì)菌病害。為了篩選蘿卜黑腐病抗源和挖掘抗病優(yōu)異基因,本文采用三種不同的鑒定方法對(duì)蘿卜種質(zhì)資源進(jìn)行了鑒定,并采用DDRT-PCR和cDNA-AFLP對(duì)不同蘿卜抗源抗黑腐病相關(guān)基因表達(dá)進(jìn)行了研究,主要研究結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)40份初選蘿卜種質(zhì)分別接種Xcc8004和XccBJ兩個(gè)菌株,進(jìn)行黑腐病苗期抗性鑒定；對(duì)其中的8份代表性蘿卜種質(zhì)采用肉質(zhì)根切片接種Xcc8004進(jìn)行抗性鑒定；對(duì)其中的2

2、7份蘿卜種質(zhì)接種8個(gè)含有效應(yīng)物基因的農(nóng)桿菌,進(jìn)行過(guò)敏反應(yīng)鑒定。結(jié)果表明:不同蘿卜種質(zhì)苗期對(duì)黑腐病的抗性存在顯著差異,篩選出對(duì)Xcc8004表現(xiàn)高抗的材料3份,對(duì)XccBJ表現(xiàn)高抗的材料1份。蘿卜苗期不同材料對(duì)Xcc8004和XccBJ的抗性表現(xiàn)極顯著相關(guān),蘿卜苗期和肉質(zhì)根對(duì)Xcc8004的抗病性極顯著相關(guān)。穩(wěn)定可靠抗病資源的獲得為蘿卜抗病育種和抗病機(jī)理深入研究提供了基礎(chǔ)材料。篩選出17份對(duì)不同效應(yīng)物表現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)的蘿卜種質(zhì)。不同抗源對(duì)不同

3、效應(yīng)物的過(guò)敏反應(yīng)程度有所不同。
　　 2.利用cDNA-AFLP技術(shù),研究了4份蘿卜抗病材料KB09-1、KB09-12、KB09-17、KB09-16和1份感病材料KB09-29接種和未接種黑腐菌Xcc8004的基因差異表達(dá)。256對(duì)引物組合在參試材料中擴(kuò)增出790個(gè)差異表達(dá)條帶?？寺〉玫降?4個(gè)差異片段按其功能分為8類(lèi)。在多份蘿卜種質(zhì)中都涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)代謝、光合作用、抗病防御及轉(zhuǎn)運(yùn)等序列的差異表達(dá)。不同蘿卜抗源表達(dá)的抗

4、性相關(guān)基因不完全相同。
　　 3.對(duì)高抗黑腐病蘿卜種質(zhì)KB09-12分別接種效應(yīng)物xopXccN和xopXccX2,利用cDNA-AFLP方法獲得153個(gè)差異表達(dá)條帶。25個(gè)測(cè)序條帶分析表明,接種xopXccN和xopXccX2公共差異表達(dá)條帶主要涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和抗病防御,接種xopXccN的特異差異表達(dá)條帶主要涉及光合作用,接種xopXccX2的特異表達(dá)差異條帶主要涉及蛋白質(zhì)合成、加工。比較KB09-12接種效應(yīng)物與接種Xcc8