高壓氧預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、腦缺血再灌注損傷是缺血性腦卒中及繼發(fā)腦缺血性損害共有的損傷機(jī)制;缺血腦組織血液供應(yīng)恢復(fù)后，腦功能沒有恢復(fù)，反而損傷加重。它的病理生理機(jī)制非常復(fù)雜，涉及眾多機(jī)制的共同參與。炎癥反應(yīng)作為腦缺血再灌注損傷其中一個(gè)病理機(jī)制，其有著至關(guān)重要的作用。腦缺血后在炎癥刺激下，白細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等炎癥細(xì)胞向缺血區(qū)域腦組織聚集，并釋放出包括細(xì)胞因子、炎癥相關(guān)酶類等炎癥介質(zhì)，然后在黏附分子的引導(dǎo)下向內(nèi)皮細(xì)胞浸潤，促進(jìn)腦缺血性損傷。缺血預(yù)處理是提

2、前給予機(jī)體一個(gè)低于損傷閾值的缺血，機(jī)體可以對其后長時(shí)間的致死性缺血產(chǎn)生耐受性。目前，誘導(dǎo)腦缺血耐受的預(yù)處理方法有多種，多項(xiàng)研究表明，高壓氧預(yù)處理作為其中一種方法能夠誘導(dǎo)腦部對缺血的耐受，減輕了缺血缺氧性損傷，表現(xiàn)出良好的神經(jīng)保護(hù)作用。但是高壓氧預(yù)處理具體的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制至今尚未完全清楚。高壓氧預(yù)處理對腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響這方面的研究亦較少，而且各種炎癥介質(zhì)在高壓氧預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受效應(yīng)的作用機(jī)制也有待進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)利用

3、大鼠MCAO模型，觀察高壓氧預(yù)處理對MCAO大鼠神經(jīng)行為缺損評分、腦梗死的面積和病理學(xué)表現(xiàn)，以及大鼠缺血腦組織炎癥介質(zhì)NF-kB、iNOS、COX-2、IL-1β、TNF-α等的影響，從炎癥反應(yīng)方面初步探討高壓氧預(yù)處理的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。
　　第一部分高壓氧預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的作用
　　目的:
　　研究高壓氧預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷是否具有保護(hù)作用。
　　方法:
　　36只SD大鼠按隨

4、機(jī)原則分為假手術(shù)組、模型組及高壓氧預(yù)處理組，每組12只。模型組和高壓氧預(yù)處理組均行大腦中動(dòng)脈栓塞術(shù)(MCAO)。高壓氧預(yù)處理組大鼠提前給予連續(xù)5天（2ATA，1h，每天一次）高壓氧預(yù)處理，最后一次預(yù)處理后3h再行MCAO。大鼠腦缺血再灌注24h后進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評分，并處死取腦組織用TTC染色檢測大鼠腦缺血梗死面積及行病理切片觀察。
　　結(jié)果:
　　高壓氧預(yù)處理組大鼠神經(jīng)功能缺損評分較模型組明顯改善(2.700000±0.6

5、32456vs.3.425000±0.636396;P＜0.05)，腦梗死面積較模型組明顯縮小(0.335±0.062 vs.0.434±0.049;P＜0.05)，腦組織病理學(xué)損傷程度明顯減輕。
　　結(jié)論:
　　大鼠MCAO局灶性缺血再灌注損傷模型能夠很好地模擬人類腦缺血疾病;高壓氧預(yù)處理對大鼠大腦中動(dòng)脈缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。
　　第二部分高壓氧預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響
　　目的:

6、
　　研究高壓氧預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響。
　　方法:
　　按照第一部分的方法對大鼠進(jìn)行高壓氧預(yù)處理和動(dòng)物造模。大鼠腦缺血再灌注24h后取缺血腦組織，制作組織勻漿，用Real time PCR法檢測NF-kB(P65)、iNOS和COX-2mRNA的表達(dá)，Western-blotting法檢測NF-kB(P65)、iNOS和COX-2蛋白的表達(dá)，酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定IL-1β和TNF-α