以SecA動力泵為靶點的新型抗綠膿桿菌藥物篩選模型的建立和應用.pdf

1、三分之一的蛋白質在合成后要被轉運到細胞質外才能發(fā)揮功能。大多數是通過Sec途徑(即分泌途徑secretionpathway)進行轉運的。其中，最為關鍵的組分之一是SecAATP酶，是蛋白質轉運途徑中的“動力泵”，通過ATP的水解循環(huán)驅使蛋白質前體穿過細菌內膜，在細菌中是不可缺少的。我們推測抑制SecA的ATP酶活性的化合物，必然會在一定程度上抑制蛋白質的轉運和分泌，這其中也包括細菌生長所必需的一些水解酶類、生長因子、負責物質運輸的蛋白質

2、、離子通道蛋白等。SecA是細菌中所特有的，因此它將為我們篩選抗細菌的藥物提供一個嶄新、低毒的靶點。 利用本實驗室已構建的高效表達SecA蛋白的基因工程菌，初步建立了SecA蛋白ATP酶活性抑制劑的初篩模型。并對7614個發(fā)酵液樣品進行了初篩，通過測量抑菌圈，得到對任意一個檢定菌有抑菌活性的發(fā)酵液樣品共計974個(初篩陽性率12.8％)。又經過兩次生物學重復，最終得到194個生物學活性較穩(wěn)定的陽性發(fā)酵液樣品(陽性率2.5％)。