雞腎發(fā)生的組織學觀察及相關活性物質的表達與調控.pdf

1、目的：通過觀察9個不同發(fā)育時期雞（Gallus domestiaus）胚胎腎組織的發(fā)生過程和5 只紅腹錦雞的腎組織，檢測表皮生長因子受體(EGFR)、轉化生長因子β(TGF-β）、水通道蛋白2（AQP-2）和Bax 蛋白在雞胚腎（小管）發(fā)生過程和紅腹錦雞腎組織中的表達，探討鳥類中腎的發(fā)生與退化，后腎發(fā)生及分化的規(guī)律和特點，同時了解紅腹錦雞腎的結構特征，并研究各種蛋白的生物活性作用及相互之間的調控意義。
　　 方法：采用組織學方法

2、和電鏡技術觀察不同發(fā)育時期雞胚胎腎組織的發(fā)生過程及紅腹錦雞（Chrysolophus pictus）腎的結構，應用免疫組織化學和體視學半定量檢測EGFR、TGF-β（β1、β2、β3）、AQP-2 及Bax 蛋白在雞胚腎（小管）發(fā)生過程和紅腹錦雞腎中的表達，用IPP 專業(yè)圖像分析軟件，對其表達強度進行定量分析。
　　 結果：(1)雞胚孵育到第16 期在中腎前端附近出現一些中腎小泡。孵育到第18 期形成中腎小管。孵育到第26 期，

3、中腎小管的盲端內陷，原始的腎小囊和腎血管球形成，中腎小管顯著伸長并迂回曲折。孵育到第33～37 期體前后部中腎組織均已形成完整的腎單位。第37～46 期體前部至后部的中腎組織依次退化。孵育到第26期從泄殖腔附近發(fā)出的輸尿管芽向生后腎組織侵入生長，生后腎組織產生許多生后腎小泡。第33 期出現腎小囊和腎小管，腎小管伸長并發(fā)生折疊，出現集合小管、近端小管和遠端小管的形態(tài)分化。第37～46 期腎小體逐漸發(fā)育成熟，腎小管繼續(xù)分化出現細段。(2)第

4、26～46 期雞胚腎的近端小管上皮細胞呈EGFR 免疫反應陽性；第26～37 期中腎的近端小管上皮細胞和遠端小管上皮細胞呈TGF-β免疫反應陽性，第33～40 期后腎的近端小管上皮細胞和遠端小管上皮細胞呈TGF-β免疫反應陽性，第44～46 期近端小管上皮細胞呈TGF-β免疫反應陽性，遠端小管上皮細胞呈TGF-β免疫反應陰性；第26～46 期雞胚腎的集合小管上皮細胞呈AQP-2 免疫反應陽性；第26～37 期中腎近端小管和遠端小管上皮細

5、胞呈Bax 反應陽性，第33～46期后腎近端小管上皮細胞呈Bax 免疫反應陽性。圖像分析顯示，在雞胚腎發(fā)生過程中EGFR，TGF-β（β1，β2，β3）和Bax 蛋白的陽性反應呈現先增強后減弱的變化，AQP-2 陽性反應呈持續(xù)增強的趨勢。(3)紅腹錦雞腎主要由許多腎單位、集合管和少量結締組織組成。腎單位是腎功能結構的基本單位，它由一個腎小體和一個與其連接的上皮性腎小管構成。血管球由一團迂回盤曲的毛細血管叢構成，結構簡單；腎小囊足細胞的突

6、起與毛細血管內皮細胞及基膜緊密相貼，三者構成腎小體的濾過屏障；近端小管由單層立方上皮組成，上皮細胞游離面有許多微絨毛，細胞界限不明顯，側面有許多指狀突起彼此交錯，質膜內褶較少；遠端小管上皮細胞基底面有豐富的質膜內褶；集合管上皮細胞有明細胞和暗細胞兩種類型；近端小管上皮細胞呈EGFR、TGF-β免疫反應陽性，集合管上皮細胞呈AQP-2 免疫反應陽性。
　　 結論：(1)雞的中腎具有排泄功能。雞后腎的發(fā)生與分化存在明顯的時間差異。腎

7、單位的分化中，同一胚齡腎組織內可存在不同發(fā)育階段的腎小體，集合小管分化較早，誘導近端小管和遠端小管分化，細段分化較遲。(2)中腎腎小管的退化可能與TGF-β和Bax 蛋白的大量表達有關。EGFR、TGF-β、AQP-2和Bax 蛋白的協同表達調控著后腎腎小管和集合小管的發(fā)生及分化成熟。在腎發(fā)育過程中集合小管上皮細胞AQP-2 表達豐富，AQP-2 可能介導胚胎發(fā)育過程中水平衡的穩(wěn)定。EGFR、TGF-β和AQP-2、Bax 蛋白在胚胎腎

8、不同發(fā)育階段具有不同的表達規(guī)律和特征，發(fā)揮著不同的功能，它們對腎單位的構筑、腎小管和集合小管上皮的成熟分化都有重要的調節(jié)作用。(3)EGFR、TGF-β、AQP-2 可能發(fā)揮著不同的功能，對紅腹錦雞腎的腎單位、腎小管和集合管結構的穩(wěn)定以及腎水的平衡等可能有重要的調節(jié)作用。(4)雞和紅腹錦雞腎結構和功能基本相似。紅腹錦雞腎的近端小管細胞頂部有許多電子密度高的短棒狀致密顆粒，底部細胞質被深染，集合管細胞頂部胞質中亦有較多具有分泌功能的囊泡。