辣椒再生體系建立及器官發(fā)生的細(xì)胞組織學(xué)觀察.pdf

1、辣椒（Capsicum.annuum L.）是亞熱帶和溫帶國(guó)家辣椒屬栽培最廣泛的一個(gè)種，是一種重要的蔬菜作物，其在中國(guó)的種植面積居蔬菜作物第2位，有著重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)意義。但辣椒對(duì)各種生物和非生物脅迫敏感，其產(chǎn)量和品質(zhì)受威脅嚴(yán)重。要獲得具有較強(qiáng)適應(yīng)性的辣椒新品種，僅依靠傳統(tǒng)的育種方法周期較長(zhǎng)，而且辣椒的遺傳背景相對(duì)狹窄，難以通過(guò)傳統(tǒng)的育種方法獲得目標(biāo)性狀改良的新品種。利用植物離體培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)進(jìn)行辣椒植株性狀改良，培育新品種，可

2、以克服物種間基因交流障礙，并且性狀改良針對(duì)性強(qiáng)、目的明確，具有較高的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用價(jià)值。通過(guò)離體培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)植株再生，建立穩(wěn)定、高效的離體再生體系則是遺傳轉(zhuǎn)化的先決條件。辣椒屬于再生頑拗型植物，同煙草、番茄、馬鈴薯等其他茄科植物相比，植株再生率低，實(shí)現(xiàn)其離體再生相對(duì)較困難。
　　辣椒離體再生有器官發(fā)生和體胚發(fā)生兩種途徑，器官發(fā)生是辣椒離體再生的常規(guī)途徑。辣椒的離體再生受多種因素的影響，特別是添加物質(zhì)的種類和濃度對(duì)辣椒離體再生的影響很大

3、，但關(guān)于它們的影響作用及其相互作用大小的研究較少。而正交設(shè)計(jì)可以減少試驗(yàn)次數(shù)、縮短試驗(yàn)周期、迅速找到優(yōu)化方案。本研究以辣味型辣椒黔椒五號(hào)和甜味型辣椒洛椒九號(hào)為試材，經(jīng)初步試驗(yàn)篩選出最適外植體后引入正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究BA、IAA、AgNO3、GA3等添加物質(zhì)對(duì)不定芽分化和伸長(zhǎng)的影響大小及其之間的相互作用，找出最適宜外植體分化和伸長(zhǎng)的添加物質(zhì)組合，再經(jīng)過(guò)生根試驗(yàn)，建立穩(wěn)定的離體再生體系。然后在最適添加物質(zhì)組合的培養(yǎng)條件下從細(xì)胞組織學(xué)上觀察辣

4、味型和甜味型器官發(fā)生過(guò)程，比較了辣味型和甜昧型辣椒器官發(fā)生的異同。主要研究結(jié)果如下:
　　1.帶柄子葉為辣椒離體再生的最優(yōu)外植體類型。
　　2.黔椒五號(hào)帶柄子葉外植體分化時(shí)，添加物質(zhì)最優(yōu)組合為:BA6.0mg/L+IAA1.0mg/L+AgNO35.0mg/L，分化率81.18％。各因素對(duì)于黔椒五號(hào)帶柄子葉外植體分化的影響大小為: BA×IAA＞BA＞ IAA×AgNO3＞ BA×AgNO3＞ IAA＞AgNO3。
　

5、　3.洛椒九號(hào)帶柄子葉外植體分化時(shí)，添加物質(zhì)最優(yōu)組合為:BA5.0mg/L+IAA0.5mg/L+AgNO35.0mg/L，分化率為94.74％。各因素對(duì)于洛椒九號(hào)帶柄子葉外植體分化的影響大小為:AgNO3＞BA＞BA× IAA＞IAA×AgNO3＞ BA×AgNO3＞ IAA。
　　4.黔椒五號(hào)不定芽伸長(zhǎng)時(shí)，添加物質(zhì)最優(yōu)組合為:BA3.0mg/L+IAA0.5mg/L+GA31.0mg/L+ AgNO30 mg/L，不定芽伸長(zhǎng)力

6、為47.52％。各因素對(duì)于黔椒五號(hào)不定芽伸長(zhǎng)的影響大小為:AgNO3＞ IAA×GA3＞ BA×IAA＞ IAA＞BA×GA3＞ GA3＞BA。
　　5.洛椒九號(hào)不定芽伸長(zhǎng)時(shí)，添加物質(zhì)最優(yōu)組合為:BA3mg/L+IAA1.0mg/L+GA32.0mg/L+AgNO30mg/L，不定芽伸長(zhǎng)力為19.35％。各因素對(duì)于洛椒九號(hào)不定芽分化的影響大小為:BA×IAA＞ IAA＞BA＞AgNO3＞GA3＞IAA×GA3＞BA×GA3。

7、>　　6.黔椒五號(hào)和洛椒九號(hào)兩個(gè)辣椒品種的不定芽生根采用MS基本培養(yǎng)基+蔗糖30.0g/L最為合適。
　　7.黔椒五號(hào)和洛椒九號(hào)器官發(fā)生是外起源。
　　8.黔椒五號(hào)在培養(yǎng)6天維管束啟動(dòng)分裂，而洛椒九號(hào)維管束在培養(yǎng)3天啟動(dòng)分裂，較早。
　　9.黔椒五號(hào)和洛椒九號(hào)外植體器官發(fā)生過(guò)程相近，先是維管束啟動(dòng)分裂，然后薄壁組織啟動(dòng)分裂，之后形成微管組織結(jié)節(jié)和分生組織結(jié)節(jié)。
　　10.洛椒九號(hào)器官發(fā)生有細(xì)胞大小接近、近圓形、排