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文檔簡介
1、實驗目的:(1)嘗試在硅磷酸鈣(C3S+MCPM)系骨水泥中添加β-焦磷酸鈣(β-Ca2P2O7,β-CPP),以期能夠調節(jié)其固化時間,改善其降解性與生物活性。(2)評價骨水泥對體外培養(yǎng)的MC3T3-E1細胞的毒性和影響,并對相關基因表達水平進行了研究。
實驗方法:(1)用吉爾摩(Gilmore)雙針法測定復合骨水泥的固化時間;采用模擬體液(SBF)浸泡實驗測定骨水泥的生物學活性。通過浸提液的pH值及其不同時間降解率的變化,并
2、結合SEM和XRD對其微觀結構進行觀察,描述β-CPP的添加對骨水泥理化性質的影響及規(guī)律;(2)通過實時定量PCR對MC3T3-E1細胞E型細胞周期蛋白(CyclinE1)及增殖細胞核蛋白Ki67的表達水平進行定量分析,并與MTT法做對比,旨在探討該復合材料的體外生物相容性。
實驗結果:(1)隨著復合材料中β-CPP含量的增大,固化時間增加。(2)復合材料具有良好的降解性,而且隨著β-CPP百分比的增大,骨水泥的降解率上升。復
3、合骨水泥浸泡過程中pH值一直保持在9.5-8.0之間。(3)MTT結果表明,濃度為12.5mg·mL-1~100mg·mL-1時實驗組浸提液對MC3T3-E1細胞沒有明顯的毒性作用,一定濃度的含β-CPP骨水泥的浸提液能刺激細胞的增殖。(4)實時定量PCR結果顯示,不含β-CPP骨水泥不同濃度的浸提液培養(yǎng)6h后,MC3T3-E1細胞CyclinE1和Ki67mRNA水平與對照組相比僅有少量提高;添加55%wtβ-CPP的骨水泥上述2個基
4、因mRNA水平均顯著增高。其中CyclinE1mRNA水平在浸提液濃度為50mg·mL-1和25mg·mL-1時,分別比對照組增加了90.18%和120.26%;Ki67mRNA水平在同樣的濃度時分別比對照組增加了31.48%和41.61%。
實驗結論:添加β-CPP使(C3S+MCPM)系骨水泥的固化時間延長,降解速率增加,細胞增殖率和基因表達量也得到一定提高。結果提示,制備的這種含β-CPP的硅磷酸鈣復合骨水泥具有良好的生
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