大鼠骨髓間充質干細胞條件培養(yǎng)基對神經干細胞凋亡及分化的影響.pdf

1、目的：
　　觀察骨髓間充質干細胞(BMSCs)條件培養(yǎng)基對神經干細胞(NSCs)凋亡及分化的影響。
　　方法：
　　提取第3代大鼠BMSCs條件培養(yǎng)基,進行濃縮。利用無水乙醇對NSCs進行凋亡的誘導,后通過AnnexinV/PI法比較加入條件培養(yǎng)基的實驗組和未加入的對照組NSCs和NSCs分化后細胞的凋亡情況。對兩組NSCs進行形態(tài)學觀察、對NSCs分化后細胞進行蛋白印跡實驗和細胞免疫熒光檢測,比較兩組NSCs分化情況

2、。
　　結果：
　　在加入了BMSCs條件培養(yǎng)基的實驗組,NSCs的凋亡率明顯低于對照組。在加入BMSCs條件培養(yǎng)基的實驗組,24 h內見懸浮生長的NSCs球開始貼壁生長。至第3 d,所有懸浮細胞球基本貼壁生長,大量細胞從中爬出,伸出突起。第7 d時,伸出細胞交織成網。對貼壁分化后的NSCs進行免疫化學染色,其表達神經元和膠質細胞的特異性蛋白。而未加入條件培養(yǎng)基的對照組,NSCs仍呈懸浮生長,未見大量細胞貼壁生長及分化。將貼

3、壁分化第七天的NSCs進行免疫熒光發(fā)現實驗組表達少突膠質細胞標志物MBP的細胞數要高于對照組,而表達星形膠質細胞標志物GFAP的細胞數則有所減低,表達神經元標志物MAP-2的細胞數兩組則無明顯差別。蛋白印跡實驗表明,加入了條件培養(yǎng)基的實驗組其MBP的表達要高于對照組,同時GFAP的表達較對照組有所減低,MAP-2則兩者無明顯差異,這一結果與免疫熒光染色觀察到的相符。
　　結論：
　　在完全去除BMSCs本身的情況下,含有大鼠