高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CD26的表達(dá)及MBL補(bǔ)體激活途徑的影響及作用機(jī)制.pdf

1、目的：觀察高糖培養(yǎng)下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）的CD26表達(dá)變化、甘露聚糖結(jié)合凝集素(MBL)補(bǔ)體途徑的激活及炎癥因子（IL-6和NF-kB）的表達(dá)情況，探討CD26在糖尿病腎病（DN）慢性炎癥發(fā)病機(jī)制中的作用，為CD26抑制劑治療DN尋求基礎(chǔ)研究依據(jù)。
　　方法：體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，分別設(shè)置正常對照組（含葡萄糖5.5mmol/L），甘露醇組（含葡萄糖5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L），高糖組（含葡萄糖30

2、mmol/L）,采用免疫組織化學(xué)法檢測細(xì)胞表面CD26、MBL、C3和膜攻擊復(fù)合物(MAC)的表達(dá)，采用Western Blot檢測細(xì)胞的CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表達(dá)，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time PCR)檢測細(xì)胞中CD26、IL-6和NF-kB mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：⑴免疫組化提示：在HUVEC中CD26、MBL、C3、膜攻擊復(fù)合物（MAC）主要表達(dá)于胞膜和胞漿。高糖組CD26、MBL、C3及

3、MAC的蛋白表達(dá)均明顯高于正常組與甘露醇組（P＜0.05）；在正常組與甘露醇組之間，各指標(biāo)蛋白表達(dá)量均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。CD26與MBL、C3、MAC蛋白表達(dá)量均呈明顯正相關(guān)（r=0.874，r=0.952，r=0.947，P＜0.01）。⑵ Western Blot提示：高糖組CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表達(dá)亦明顯高于正常組及甘露醇組（P＜0.05）；在正常組與甘露醇組之間，各指標(biāo)蛋白表達(dá)量均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.

4、05）。CD26與MBL、C3、MAC蛋白表達(dá)量呈明顯正相關(guān)（r=0.825，r=0.869，r=0.828，P＜0.01）。⑶ RT-PCR提示：高糖組CD26、IL-6、NF-kB的mRNA表達(dá)均高于正常組及甘露醇組（P＜0.05）；在正常組與甘露醇組之間，各指標(biāo)mRNA表達(dá)量均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。CD26與IL-6、NF-kB的mRNA表達(dá)量均呈正相關(guān)（r=0.858，r=0.794，P＜0.05）。
　　結(jié)論：體