FHIT、p16基因表達異常與HPV16感染在宮頸癌變中的交互效應.pdf

1、目的：
　　 宮頸癌是嚴重危害婦女健康的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤。目前已明確高危型HPV(HR-HPV)持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的主要原因。抑癌基因啟動子區(qū)CpG島甲基化是導致抑癌基因失活的重要機制，抑癌基因p16和FHIT與宮頸癌關系密切，但其在宮頸癌中的表達不盡一致，且在宮頸癌中的表達與HPV16感染的關系尚存爭議。關于FHIT、p16基因表達異常與HPV16感染在宮頸癌變中交互效應的研究目前報道甚少且觀點不一。本研究旨在探討FHIT、

2、p16蛋白異常表達與HPV16感染的關系以及在宮頸癌變中的交互效應。
　　 方法：
　　 選擇2009年9月-2011年3月在山西醫(yī)科大學腫瘤醫(yī)院就診的宮頸鱗狀細胞癌新發(fā)病人100例，在山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院婦科、太原市婦幼保健院和介休市婦幼保健院婦科就診的宮頸上皮內瘤樣變(CIN)患者142例（其中CINⅠ72例，CINⅡ/Ⅲ70例）及宮頸炎癥患者108例為研究對象。采用結構式問卷收集研究對象的入口學特征、性行為、衛(wèi)生及

3、生殖因素等資料，采集手術或活檢宮頸組織標本。用多重PCR法檢測HPV16感染狀況，甲基化特異性PCR(MSP)法檢測FHIT、p16基因CpG島甲基化狀態(tài)，Westemblotting法檢測FHIT和p16蛋白表達，實時熒光定量PCR(realtimePCR)法檢測HPV16E6/E7、FHIT和p16的mRNA水平。使用SPSS13.0軟件對資料進行整理分析，正態(tài)分布資料采用方差分析，方差不齊的采用Welch檢驗，分類資料采用x2檢驗

4、和趨勢x2檢驗，宮頸癌相關因素采用單因素和多因素Logistic回歸分析，用交互作用的相加模型進行交互效應分析。
　　 結果：
　　 (1)HPV16感染率在crNⅠ組(45.8％)、CINⅡ/Ⅲ組(68.6％)和宮頸癌組(73.0％)均高于宮頸炎組(28.7％)(x2=5.452，P=0.020;x2=25.607，P＜0.001;x2=37.788，P＜0.001)，隨宮頸病變程度加重，HPV16感染率逐漸升高(x2

5、趨勢247.623，P＜0.001)。宮頸癌組HPV16E6mRNA的表達分別高于宮頸炎組(P＜0.001)和CINⅠ組(P=0.004)；宮頸癌組HPV16E7mRNA的表達分別高于宮頸炎組（P＜0.001）、CINⅠ組(P＜0.001)和CINⅡ/Ⅲ組(P=0.018)。
　　 (2)FHITCpG島甲基化率在宮頸炎組、crNⅡ組、CINⅡ/Ⅲ組和宮頸癌組分別為3.7％、13.9％、21.4％和38.0％，隨宮頸病變程度加重

6、FHITCpG島甲基化率逐漸升高(x2趨勢=40.147，P＜0.001)；FHIT蛋白表達在CINⅠ組(1.184±0.172)，CINⅡ/Ⅲ組(1.133±0.126)和宮頸癌組(1.099±0.148)均低于宮頸炎組(1.255±0.130)(P=0.001，P＜0.001，P＜0.001)。FHITmRNA表達在宮頸癌組和CINⅡ/Ⅲ組低子宮頸炎組（P＜0.001，P=0.002），宮頸癌組低于CINⅡ/Ⅲ組(P-0.020)。

7、FHITCpG島甲基化、FHIT蛋白低表達和HPV16感染在不同宮頸病變組均有正相加作用。HPV16E6和FHITmRNA表達存在負相關，r=-0.142(P=0.008)。
　　 (3)p16CpG島甲基化率在宮頸炎組、CINⅠ組、CINⅡ/Ⅲ組和宮頸癌組分別為0.9％、11.1％、18.6％和35.0％，隨宮頸病變程度加重，p16CpG島甲基化率逐漸升高(x2趨勢=44.976，P＜0.001)。p16蛋白表達在CINⅠ組(

8、1.231±0.410)，CINⅡ/Ⅲ組(1.967±0.617)和宮頸癌組(2.123±0.524)均高于宮頸炎組(0.780±0.333)（均為P＜0.001）。p16mRNA表達在宮頸癌組和CINⅡ/Ⅲ組高于宮頸炎組（P＜0.001，P=0.030），宮頸癌組的表達高于CINⅡ/Ⅲ組和CINⅠ組(P=0.029，P＜0.001)。p16CpG島甲基化、p16蛋白高表達和HPV16感染在不同宮頸病變組有正相加作用。HPV16E7和p

9、16mRNA表達存在正相關，r=0.397，(P＜0.001)。
　　 (4)將單因素分析有統(tǒng)計學意義的因素，包括宮頸癌變相關因素和p16CpG島甲基化、p16蛋白、p16mRNA、FHITCpG島甲基化、FHIT蛋白、FHITmRNA、HPV16等進行多因素Logistic回歸分析。影響CINⅠ的主要危險因素有FHITmRNA、蛋白低表達，p16蛋白高表達，F(xiàn)HITCpG島高甲基化，洗陰頻率低，性生活后不清洗，產次多，有腫瘤家

10、族史；影響CINⅡ/Ⅲ的主要危險因素有HPV16感染，F(xiàn)HITmRNA、蛋白低表達，p16mRNA、蛋白高表達，F(xiàn)HITCpG島高甲基化，務農，洗陰頻率低，孕次多，有人工流產史、婦科病史和腫瘤家族史；影響宮頸癌的主要危險因素有HPV16感染，F(xiàn)HITmRNA、蛋白低表達，p16mRNA、蛋白高表達，F(xiàn)HITCpG島高甲基化，務農，洗陰洗澡頻率低，孕產次多，有人工流產史、婦科病史和腫瘤家族史。
　　 結論：
　　 (1)F

11、HIT蛋白低表達可增加宮頸癌變風險，隨著宮頸病變進展，F(xiàn)HIT蛋白高表達率逐漸降低，F(xiàn)HIT基因CpG島甲基化和HPV16感染均為導致宮頸癌組織中FHIT蛋白表達降低的因素，F(xiàn)HITCpG島甲基化、FHIT蛋白低表達和HPV16感染在宮頸癌變中可能具有協(xié)同作用。
　　 (2)隨宮頸病變進展，p16CpG島甲基化率逐漸增高，p16蛋白表達逐漸增高，p16蛋白高表達與HPV16E7的異常高表達有關，p16蛋白高表達、HPV16感染與

12、p16CpG島甲基化在宮頸癌變中可能具有協(xié)同作用。
　　 (3)宮頸癌中FHIT蛋白低表達可能與基因CpG島甲基化和HPV16E6的異常高表達有關，而p16蛋白在宮頸癌中的高表達可能與HPV16E7的異常高表達有關。
　　 (4)宮頸癌的發(fā)生是多種因素共同作用的結果。本次研究再次提示HPV16感染與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關，HPV16E6、E7癌基因高表達不僅是宮頸癌的危險因素，而且與宮頸癌變的進展有關，務農、性衛(wèi)生習