人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)方法的比較.pdf

1、目的：兩種體外培養(yǎng)、擴(kuò)增、純化人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞方法的比較。
　　方法：無菌條件下采取40例足月順產(chǎn)的臍帶血，肝素抗凝。應(yīng)用Ficoll密度梯度離心法分離臍血單核細(xì)胞。將利用Ficoll密度梯度離心法分離得到的細(xì)胞隨機(jī)分為兩組，分別用兩種培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。A組20例用MesenGro人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；B組20例用DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。對(duì)比兩組梭形的間充質(zhì)干細(xì)胞出現(xiàn)時(shí)間、細(xì)胞集落出現(xiàn)時(shí)間、培養(yǎng)時(shí)間、P0代細(xì)胞數(shù)量。選用生

2、長情況良好細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞表面特異性標(biāo)記表達(dá)情況。
　　結(jié)果：A組梭形的間充質(zhì)干細(xì)胞平均出現(xiàn)時(shí)間為6.75±0.97d，細(xì)胞集落平均出現(xiàn)時(shí)間為9.9±1.12d，P0代細(xì)胞平均培養(yǎng)時(shí)間為19.95±1.40d，P0代細(xì)胞平均數(shù)量為(8.15±0.35)×105；B組梭形的間充質(zhì)干細(xì)胞平均出現(xiàn)時(shí)間為10.45±1.50d，細(xì)胞集落平均出現(xiàn)時(shí)間為14.95±1.57d，P0代細(xì)胞平均培養(yǎng)時(shí)間為28.60±1.90d，

3、P0代細(xì)胞平均數(shù)量為(6.34±0.63)×105。A組優(yōu)于B組（P<0.01）。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示，培養(yǎng)的細(xì)胞強(qiáng)表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志CD73和CD105，陽性率99.1％，不表達(dá)造血干細(xì)胞表面標(biāo)志CD45和CD34，陰性率99.3%。
　　結(jié)論：在培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài)、生長速度和培養(yǎng)時(shí)間諸方面，MesenGro人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基均優(yōu)于DMEM培養(yǎng)基。選用MesenGro人間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基可以更純、更快、更好地從臍