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文檔簡介
1、當前,在農產品生產中,尤其是蔬菜、水果生產的過程中,噴灑化學農藥還是必要的手段。目前普遍使用的農藥主要是有機磷,氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯等三大類,擬除蟲菊酯的毒性相對較低。當前對人畜造成危害,引起人們中毒的主要還是前兩類農藥,并且有研究表明:某些有機磷農藥對動物有致畸性和致癌性。因此,對瓜果蔬菜進行農藥殘留的測定有很重要的意義。目前,常用的農藥殘留的檢測方法主要是氣相色譜法,液相色譜法和色譜-質譜聯(lián)用法,但是這些方法對儀器設備的性能和操作
2、人員的素質有較高的要求。而且由于瓜果蔬菜的特殊性,其從采摘到上市時間較短,要在這么短的時間內了解瓜果蔬菜上農藥殘留的污染狀況,就需要采用快速測定法。 本文在以下三個方面進行了研究:(1)闡述有機磷和氨基甲酸酯類農藥如何對乙酰膽堿酯酶的活性進行抑制;(2)實驗條件的優(yōu)化,由于膽堿酯酶的活性受諸多因素的影響,如濃度,pH值,反應時間等,我們對實驗pH、實驗溫度、反應時間等實驗條件進行優(yōu)化,確定最佳分析條件。(3)對建立的方法進行方法
3、學驗證,繪制辛硫磷、三唑磷、毒死蜱、滅多威、異丙威、仲丁威、速滅威、甲萘威等農藥的測定標準曲線。做各自的精密度實驗和準確度實驗。 論文主要工作如下: 一、闡述有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶的活性的抑制的原理 乙酰膽堿酯酶(AChE)上有有機磷與氨基甲酸酯類化合物的作用位點,當這兩類化合物與AChE結合后,會造成酶催化部位的磷酰化與氨基甲?;蛊鋵σ阴;饔脽o法進行,從而破壞了正常的神經傳導作用。
4、 二、生化分析儀測定膽堿酯酶的條件優(yōu)化 對實驗pH、實驗溫度、反應時間等實驗條件進行優(yōu)化,從而確定最佳分析條件。由于有機磷和氨基甲酸酯類農藥主要是有機合成殺蟲劑,采用甲醇作為溶劑既能很好的溶解待測農藥,而且也不會明顯的抑制膽堿酯酶的活性,完全能夠滿足實驗的需要。在測定時我們只取了3μL的樣品提取液與血清中膽堿酯酶反應,使樣品提取液的體積只占反應體積的1/100左右,同時也最大程度地避免了甲醇對測定的干擾。通過實驗還得到反應的最佳
5、條件:實驗pH:7.5,實驗溫度:37℃;反應時間:5分鐘。 三、生化分析儀快速測定農藥的方法學驗證 作出辛硫磷、三唑磷、毒死蜱、滅多威、異丙威、仲丁威、速滅威、甲萘威等農藥的測定標準曲線,相關系數(shù)分別為:0.999、0.995、0.999、0.997、0.995、0.995、0.999、0.997。同時還分別得到了各種農藥測定方法的最低檢測限、精密度和準確度,均滿足測定的要求。 本法具有操作簡便、準確、靈敏、重
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