遼寧地區(qū)XPD基因多態(tài)性和原發(fā)性肝癌危險性的病例-對照研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：本實驗通過檢測肝癌患者及正常對照XPD遺傳多態(tài)性，了解原發(fā)性肝癌的發(fā)生與XPD多態(tài)性有關，探討DNA修復基因XPD多態(tài)性和原發(fā)性肝癌易感性的關系。 方法：采用碘化鉀方法從抗凝血中提取基因DNA。PCR擴增XPD—751多態(tài)。各基因設計引物如下：XPD751：5'—GCCCGCTCTGGATTATACG—3'和5'—CTATCATCTCCTGGCCCCC—3'。PCR反應：XPD—751、RCC1—194和XRCC1—399

2、。反應條件為94℃預變性2min，然后94℃30秒、57℃30秒、72℃45秒，30個循環(huán)后，72℃終延伸7min。XRCC1280將30個循環(huán)中的57℃改為59℃，其余條件同上。電泳分析PCR產物。對PCR產物進行酶切，XPD—751基因對應的內切酶為PstⅠ。取PCR產物5μl與相應的限制性核酸內切酶于37℃水浴過夜，用1.5％瓊脂糖凝膠電泳分析酶切產物。 結果：①94例肝癌患者XPD751基因Lys/Lys，Lys/Gln

3、，Gln/Gln多態(tài)基因型頻率分別為69(73.4％)，24(25.5％)和1(1.1％)，而111例健康對照組分別為97(87.4％)、14(12.6％)和0(0％)；兩組間比較有非常顯著的差異(p=0.011)。②經Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)攜帶至少1個751Gln等位基因(Lys/Gln和Gln/Gln基因型)的個體患肝癌的危險顯著增高(OR=2.51，95％CI為1.22—5.181，p=0.011)。 結論：XPD—

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