蟾酥膠囊含藥血清誘導(dǎo)人肝癌BEL-7402細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、目的：研究蟾酥膠囊含藥血清對人肝癌BEL-7402細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用及蛋白Bcl-2、Fas、Apo2.7在肝癌凋亡細(xì)胞中的表達(dá)，探討蟾酥膠囊誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制。 方法：選用純種成年新西蘭大白兔20只，隨機(jī)分為兩組，每組10只，用血清藥理學(xué)方法，一組制備含藥血清，另一組制備無藥血清。實驗組細(xì)胞分別加10％、20％、30％含藥血清，對照組細(xì)胞加10％無藥血清，分別孵育24h、48h，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；用臺盼藍(lán)染

2、色檢測細(xì)胞藍(lán)染率；MTT(四甲基偶氮唑鹽)比色法檢測細(xì)胞抑制率；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞周期變化及Apo2.7蛋白的陽性表達(dá)率；免疫細(xì)胞化學(xué)法染色檢測蛋白Bcl-2、Fas的陽性表達(dá)率。 結(jié)果：相差顯微鏡下可見，實驗組部分細(xì)胞變小、變圓，貼壁能力明顯下降，呈漂浮生長狀態(tài)，集落生長特性明顯降低，呈單個生長狀態(tài)；臺盼藍(lán)染色顯示，細(xì)胞藍(lán)染率無明顯變化；MTT比色顯示，細(xì)胞存活率降低，細(xì)胞增殖明顯受到抑制；流式細(xì)胞儀檢測，可見明顯

3、的凋亡峰，細(xì)胞周期中G1、S期下降，G2/M期升高，Apo2.7蛋白表達(dá)增高，細(xì)胞凋亡率隨著藥物作用時間及含藥血清濃度的改變而改變；免疫細(xì)胞化學(xué)法染色顯示，Bcl-2蛋白表達(dá)降低，F(xiàn)as蛋白表達(dá)升高。各實驗組的上述檢測指標(biāo)與對照組相比較，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論：蟾酥膠囊含藥血清可以誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞BEL-7402凋亡，且細(xì)胞凋亡率與藥物作用時間和含藥血清濃度呈一定的時效和量效關(guān)系；探討其誘導(dǎo)機(jī)制發(fā)現(xiàn)，可能與下調(diào)Bc