脂筏在CB2受體介導(dǎo)的內(nèi)源性大麻素AEA抑制大鼠肝星狀細(xì)胞增殖活性中的作用.pdf

1、目的：
　　 探討脂筏在CB2受體介導(dǎo)的內(nèi)源性大麻素AEA抑制大鼠肝星狀細(xì)胞增殖活性中的作用及作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 1．采用MTT法檢測不同濃度的AEA和MCD對(duì)HSC的作用效應(yīng)；
　　 2．構(gòu)建Cnr2-shRNA轉(zhuǎn)染HSC細(xì)胞，采用MTT法檢測轉(zhuǎn)染前后不同濃度的AEA和MCD對(duì)HSC的作用效應(yīng)；
　　 3．采用Western Blot檢測不同濃度內(nèi)源性大麻素AEA及MCD作用后

2、HSC中p-P38MAPK和p-JNK的表達(dá)量；
　　 4．采用激光共聚焦法檢測HSC上的LRs以及CB2受體的表達(dá)；
　　 5．采用蔗糖密度梯度離心法提取LRs，Western Blot鑒定LRs并檢測LRs中CB2受體的表達(dá)
　　 結(jié)果：
　　 1．成功構(gòu)建Cnr2-ShRNA轉(zhuǎn)染篩選Cnr2-單克隆細(xì)胞株，MTT檢測發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染后CB2受體的減少能減弱AEA對(duì)HSC細(xì)胞增殖的抑制作用，然而用MCD

3、預(yù)處理HSC細(xì)胞后CB2受體的減少對(duì)AEA的效應(yīng)無明顯影響。
　　 *國家自然科學(xué)基金（NO：30571627）
　　 2．P-P38MAPK和p-JNK的表達(dá)與AEA濃度有依賴關(guān)系，且可以被MCD部分拮抗。
　　 3．CB2受體在HSC膜脂筏和胞漿中均有表達(dá)，但用蔗糖密度梯度離心法提取AEA刺激前HSC細(xì)胞脂筏，發(fā)現(xiàn)未受AEA刺激時(shí)脂筏中含有的CB2受體量很少，CB2受體大部分存在于HSC細(xì)胞胞漿中。