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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白在百草枯誘導(dǎo)的大鼠急性肺損傷中的變化
方法
于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心將80只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和百草枯染毒組(簡(jiǎn)稱PQ組),每組40只。采用腹腔內(nèi)注射百草枯建立急性肺損傷模型,造模后于8h,1d,3d,5d分別處死對(duì)照組(A、B、C、D組)和PQ組(E、F、G、H組)各10只。采用HE染色觀察肺組織病理學(xué)變化,Westernblot和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)GR
2、P78和CHOP蛋白水平。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±s)表示,采用SPSS17.0軟件,單因素方差分析法比較多個(gè)樣本均數(shù)、LSD-t檢驗(yàn)法進(jìn)行均數(shù)之間的兩兩比較,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果
(1)肺組織病理學(xué)檢查可見(jiàn)百草枯中毒大鼠肺組織結(jié)構(gòu)破壞增加,肺泡間隔斷裂,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),并隨時(shí)間延長(zhǎng),肺組織損傷逐漸加重。(2)Westernblot檢測(cè)示對(duì)照組8h、1d、3d、5d中GRP78/GAPDH灰度比
3、值為(0.78±0.0339、0.76±0.0491、0.771±0.0533、0.775±0.0313),PQ組8h、1d、3d、5d中GRP78/GAPDH灰度比值為(1.361±0.2466、0.936±0.138、0.85±0.0889、0.528±0.1123),E組與A組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.92,P<0.05),F(xiàn)組與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.4,P<0.05)。對(duì)照組8h、1d、3d、5d中CHOP/GA
4、PDH灰度比值為(0.6±0.1153、0.61±0.073、0.65±0.019、0.63±0.0993),PQ組8h、1d、3d、5d中CHOP/GAPDH灰度比值為(2.335±0.0933、1.824±0.1121、1.158±0.0421、0.632±0.0883)。E組與A組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=31.76,P<0.05),F(xiàn)組與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=22.23,P<0.05),G與C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=
5、9.3,P<0.05)。對(duì)照組GRP78、CHOP蛋白表達(dá)水平基本相同,染毒8h組GRP78、CHOP蛋白表達(dá)明顯增加,,且隨時(shí)間推移,GRP78、CHOP蛋白表達(dá)逐漸下降。(3)免疫組化染色顯示:正常大鼠肺組織中僅有少數(shù)細(xì)胞胞漿呈淺黃色,染毒組大鼠肺組織細(xì)胞的陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色,較對(duì)照組染色明顯增強(qiáng),且染毒8h組陽(yáng)性表達(dá)最多,GRP78陽(yáng)性表達(dá)主要位于支氣管上皮細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞以及少量的肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)。而CHOP陽(yáng)性表達(dá)主要位
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