大鼠骨髓基質(zhì)干細胞誘導分化為神經(jīng)元樣細胞相關分子機制研究.pdf

1、第一部分還原型谷胱甘肽誘導大鼠骨髓基質(zhì)干細胞分化過程中NSE、GFAP相關mRNA及蛋白表達變化研究 目的：初步探討還原型谷胱甘肽(GSH)對大鼠骨髓基質(zhì)干細胞(bone marrow stromalcells，BMSCs)的誘導分化機制。 方法：體外培養(yǎng)和純化大鼠BMSCs，用GSH對其進行誘導，分別于誘導后6h、12h、24h后對其進行實時定量PCR和Westblot檢測，測定各組中神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron

2、 specific enolase，NSE)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP) mRNA及蛋白水平的表達情況。 結果：誘導6h、12h、24h后BMSCs分化形成神經(jīng)元樣細胞和膠質(zhì)細胞樣細胞，實時定量PCR和Westblot檢測結果表明BMSCs中NSE及GFAP的mRNA與蛋白水平表達明顯高于對照組，以12h最為明顯。 結論：GSH可以誘導BMSCs分化形成神

3、經(jīng)元樣細胞和膠質(zhì)細胞樣細胞，且誘導后NSE及GFAP的mRNA與蛋白水平表達增高。 第二部分堿性成纖維細胞生長因子與表皮生長因子誘導大鼠骨髓基質(zhì)干細胞向神經(jīng)元樣細胞分化相關基因表達譜研究 目的：初步探討大鼠骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)向神經(jīng)元樣細胞分化前后基因表達譜的變化，尤其是與神經(jīng)元發(fā)育相關基因的表達情況。 方法：體外培養(yǎng)和純化大鼠BMSCs，用堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblastgrow

4、th factor，bFGF)和表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)對其進行誘導，分別于誘導前和誘導后第七天用Affymetrix大鼠表達譜芯片檢測，并且利用生物信息學分析技術比較誘導前后基因表達譜的改變。 結果：共有差異基因216條，其中上調(diào)基因125條，下調(diào)基因91條。與神經(jīng)元發(fā)育密切相關的基因有13條，其中上調(diào)7條，下調(diào)6條。 結論：經(jīng)體外誘導的BMSCs具有向神經(jīng)元分化的潛能并