大黃附子湯對(duì)大鼠失血性休克復(fù)蘇后腸道免疫屏障的影響.pdf

1、目的:觀察大黃附子湯對(duì)大鼠失血性休克復(fù)蘇后小腸粘膜CD3+、γδT細(xì)胞、防御素-5（RD-5）及分泌性免疫球蛋白A(SIgA)的影響，探討大黃附予湯對(duì)大鼠失血性休克復(fù)蘇后腸道粘膜免疫屏障功能的保護(hù)作用及機(jī)理。
　　 方法:健康清潔級(jí)雄性SD大鼠，72只，隨機(jī)分為3組:對(duì)照組、模型組、大黃附子湯組，每組24只，各組再按失血性休克模型制備成功后0、6、12h分為三個(gè)亞組，每組8只大鼠。對(duì)照組依次行腹腔麻醉，右頸總動(dòng)脈、右股靜脈、左股

2、動(dòng)脈插管及全身肝素化，空腸造瘺后關(guān)腹，于關(guān)腹后即刻、3、6h分別予以生理鹽水2ml保留灌腸。模型組和大黃附子湯組分別在對(duì)照組基礎(chǔ)上采用Wiggers改良法制備HS大鼠模型。模型組和大黃附子湯組分別在復(fù)蘇后即刻、3、6h分別予以生理鹽水、大黃附子湯2ml保留灌腸。三組分別于0、6、12h處死動(dòng)物前采用激光散斑技術(shù)監(jiān)測(cè)回腸末端血流量，并經(jīng)右股靜脈取血，采用ELISA法測(cè)定血清中腸脂肪酸蛋白(IFABP)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的水平

3、，采用動(dòng)態(tài)比濁法檢測(cè)血清中內(nèi)毒素(LPS)的水平。各組按時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，分別取距回盲部交界處近側(cè)10cm的末端回腸各10cm，分離提取小腸粘膜CD3+、γδT細(xì)胞，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)小腸粘膜CD3+、γδT細(xì)胞百分比;另取大鼠末端回腸重約100mg，用于分離提取大鼠防御素-5(RD-5) mRNA，進(jìn)行RT-PCR;最后另取大鼠回腸組織，光鏡下觀察各組大鼠小腸粘膜組織形態(tài)學(xué)的改變。
　　 結(jié)果:(1)大黃附子湯對(duì)大鼠末端回腸血流

4、量的影響:與對(duì)照組比較，模型組在失血性休克1h時(shí)大鼠末端回腸血流量明顯下降，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;與模型組比較，大黃附子湯組的血流量在6、12h時(shí)明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。(2)大鼠末端回腸CD3+細(xì)胞含量百分比的變化:與對(duì)照組比較，模型組在休克1h時(shí)，大鼠末端回腸CD3+細(xì)胞含量百分比明顯減少，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;與模型組比較，大黃附子湯組大鼠末端回腸CD3+細(xì)胞含量百分比在6h

5、升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），在12h時(shí)明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01)。(3)大鼠末端回腸γδT細(xì)胞含量百分比的變化:與對(duì)照組比較，模型組在休克1h時(shí)，大鼠末端回腸γδT細(xì)胞含量百分比明顯減少，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，大黃附子湯組大鼠末端回腸γδT細(xì)胞含量百分比在6h時(shí)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），在12h時(shí)明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。(4)大鼠末端回腸

6、RD-5的表達(dá)變化:與對(duì)照組比較，模型組在失血性休克1h時(shí)RD-5的表達(dá)明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;與模型組比較，大黃附子湯組的RD-5表達(dá)在6、12h時(shí)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。(5)血清中SIgA含量的變化:與對(duì)照組比較，模型組在休克1h時(shí)，大鼠血清中SIgA含量明顯減少，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;與模型組比較，大黃附子湯組大鼠血清中SIgA含量在6h升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、意義（P＜0.05），在12h時(shí)明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。(6)血清中IFABP含量的變化:與對(duì)照組比較，模型組在休克1h時(shí)，大鼠血清中IFABP含量明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與模型組比較，大黃附子湯組大鼠血清中IFABP含量在6h降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），在12h時(shí)明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。(7)血清中LPS含量的變化:與對(duì)照組比較，模型組在休克1h時(shí)，大

8、鼠血清中LPS含量明顯升高，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）;與模型組比較，大黃附子湯組大鼠血清中LPS含量在6h降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），在12h時(shí)明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 結(jié)論:(1)失血性休克復(fù)蘇后大鼠末端回腸血流量明顯地下降，腸粘膜CD3+、γδT的細(xì)胞含量百分比顯著地降低，末端回腸RD-5 mRNA的表達(dá)反應(yīng)性增加，同時(shí)血清中SIgA的濃度下降，提示失血性休克時(shí)腸道粘膜免