馬凡綜合征FBN1、TGFBR2、TGFBR1基因突變研究.pdf

1、目的: 對8例(1～8號)無親緣關系的馬凡綜合征(Marfan syndrome，MFS)患者的原纖蛋白-1(fibrillin-1，F(xiàn)BN1)基因、轉化生長因子-β受體2(Transforming Growth Factor Beta Receptor Type Ⅱ，TGFBR2)基因和轉化生長因子-β受體1(Transforming Growth Factor Beta Receptor Type Ⅰ，TGFBR1)基因進行

2、突變篩查，并鑒定這些基因突變的位點和類型，以及觀察基因突變與臨床表型之間的關系。 方法: 應用變性高效液相色譜(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)-異源雙鏈分析(heteroduplex analysis)對8例(1～8號)MFS患者FBN1基因的65個外顯子、TGFBR2基因的7個外顯子和TGFBR1基因的9個外顯子進行突變篩查，對疑有突變的

3、DNA擴增片段進行測序，以明確突變位點及類型。另外選取50例正常人作為DHPLC分析的正常對照。 結果: 1.在8例無親緣關系的MFS患者中檢出FBN1基因6個不同的突變：26號外顯子的第3295個堿基置換(3295G>T)，造成無義突變(E1099X)；37號外顯子的第4621個堿基置換(4621C>T)，造成無義突變(R1541X)；40號外顯子的第5015個堿基置換(5015G>C)，造成錯義突變，使FBN1第24

4、個cbEGF上高度保守的半胱氨酸被絲氨酸替代(C1672S)；50號內含子的+1堿基置換(IVS50+1G>A)，可能是一個剪接位點的突變；58號外顯子的第7241個堿基置換(7241G>A)，造成錯義突變，使FBN1第37個cbEGF上第2414個核苷酸精氨酸被谷氨酰胺替代(R2414Q)；62號外顯子的第7769個堿基置換(7769G>A)，造成錯義突變，使FBN1第41個cbEGF上高度保守的半胱氨酸被酪氨酸替代(C2590Y)。

5、突變包括3個錯義突變(3/6)，2個無義突變(2/6)，一個剪接位點突變(1/6)。其中4個為新發(fā)現(xiàn)的突變。 2.用相同的方法在這8例MFS患者中發(fā)現(xiàn)了其他4個FBN1基因單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)：IVS27+3A>G、3442C>G(P1148A)、IVS45+29insT、IVS62+8A>C。其中IVS27+3A>G、IVS45+29insT為新發(fā)現(xiàn)的多態(tài)性。

6、 3.用相同的方法在這8例MFS患者中未檢出TGFBR1、TGFBR2基因確定的突變。 結論: 1.FBN1基因的錯義突變、無義突變、剪接位點突變可能是相應MFS患者的致病原因。 2.FBN1基因的4個單核苷酸多態(tài)性不是MFS患者致病原因。 3.DHPLC是一種高效、簡便、經濟可靠的基因突變篩選方法，適用于大規(guī)模的基因突變篩查。 4.FBN1、TGFBR2和TGFBR1基因突變篩查從基因水平