氧化-心理應(yīng)激對認(rèn)知功能及Aβ代謝途徑的影響.pdf

1、氧化應(yīng)激和心理應(yīng)激是人類正常生命進(jìn)程中不可避免、與生理病理密切相關(guān)的事件，二者與老年性癡呆病理特征β-淀粉樣蛋白(β-amyloidprotein，Aβ)的生成密切相關(guān)。然而對于氧化應(yīng)激、心理應(yīng)激尤其是二者共同作用時腦內(nèi)Aβ1-42及其代謝途徑中相關(guān)分子的變化，目前尚未完全闡明。為了探討這個問題，我們進(jìn)行了如下研究工作： 首先，確定D-半乳糖致氧化應(yīng)激損傷的適宜劑量。根據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計結(jié)果，選擇75、120、150和1000mg/kg

2、劑量的D-半乳糖，連續(xù)8周注射，觀察小鼠認(rèn)知功能及腦內(nèi)氧化酶學(xué)指標(biāo)變化。結(jié)果表明，四個劑量D-半乳糖均能導(dǎo)致小鼠認(rèn)知功能損傷，腦內(nèi)超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)、過氧化氫酶(catalase，CAT)活性下降和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量增加，但對不同指標(biāo)損傷程度不同，結(jié)合小鼠給藥期間的一般狀態(tài)變化，我們選取120mg/kg做為氧化應(yīng)激模型適宜劑量。 其次，通過D-半乳糖

3、建立氧化應(yīng)激模型，急性束縛建立心理應(yīng)激模型，采用行為學(xué)、生化檢測、放射性免疫和免疫組化等方法，探討氧化應(yīng)激、心理應(yīng)激尤其是二者共同作用對小鼠認(rèn)知功能和腦內(nèi)Aβ1-42表達(dá)的影響。三個應(yīng)激組小鼠腦內(nèi)SOD和CAT活性降低，MDA增加，心理應(yīng)激和復(fù)合應(yīng)激組小鼠血清皮質(zhì)酮含量升高，表明氧化應(yīng)激和心理應(yīng)激模型是可行性的。三個應(yīng)激組小鼠出現(xiàn)不同程度認(rèn)知功能損傷，其中氧化應(yīng)激對空間認(rèn)知損傷明顯，心理應(yīng)激和復(fù)合應(yīng)激對空間和非空間認(rèn)知都有損傷。三個應(yīng)激

4、組中小鼠腦內(nèi)Aβ1-42表達(dá)均有增加，而且復(fù)合應(yīng)激組較單一應(yīng)激組增加更明顯。 最后，探討腦內(nèi)Aβ1-42表達(dá)增加可能的代謝機(jī)制。采用westernblotting和RT-PCR方法，考察腦內(nèi)Aβ1-42的生成、降解和轉(zhuǎn)運途徑中主要信號分子的改變。結(jié)果表明，三種代謝途徑都參與了不同應(yīng)激條件下腦內(nèi)Aβ1-42的代謝，其中BACE1表達(dá)上調(diào)可能是氧化應(yīng)激和心理應(yīng)激誘導(dǎo)腦內(nèi)Aβ1-42生成增加的主要途徑；MMP-2和IDE表達(dá)的增加，說

5、明降解過程參與了應(yīng)激條件下腦內(nèi)Aβ1-42的清除；氧化應(yīng)激和心理應(yīng)激組中IDE表達(dá)不同，提示在不同應(yīng)激原作用下，發(fā)揮作用的降解酶及作用程度可能不同；三個應(yīng)激組中LRP-1表達(dá)增加，RAGE表達(dá)變化不明顯，說明氧化和心理應(yīng)激下，腦內(nèi)Aβ1-42會向腦外轉(zhuǎn)運，而腦外Aβ不會向腦內(nèi)轉(zhuǎn)運，可能是機(jī)體在應(yīng)激刺激下的保護(hù)機(jī)制。復(fù)合應(yīng)激能增加單一應(yīng)激中BACE1的表達(dá)，可能與氧化應(yīng)激和心理應(yīng)激共同作用有關(guān)。復(fù)合應(yīng)激中MMP-2和LRP-1表達(dá)較單一應(yīng)