腫瘤細(xì)胞輻射敏感性評價(jià)及ANTP-SmacN7融合肽的腫瘤細(xì)胞輻射增敏作用研究.pdf

1、目前在腫瘤的放射治療中,經(jīng)常發(fā)現(xiàn)同種腫瘤及同病理類型的不同病人其治療效果有很大差異,對周圍正常組織的損傷程度也不同。其中一個重要的原因就是腫瘤細(xì)胞對射線的敏感性不同。本研究旨在建立敏感而快捷的方法和指標(biāo),在放療前預(yù)測不同患者的腫瘤輻射敏感性,據(jù)此設(shè)計(jì)不同的個體化放療方案,達(dá)到優(yōu)化治療的目的。
　　 通過體外實(shí)驗(yàn)和動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn),對不同腫瘤細(xì)胞株和動物接種實(shí)體瘤經(jīng)不同劑量γ射線照射后,用PCR和單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)分析產(chǎn)生線粒體DNA

2、4977缺失(△mtDNA4977)的不同劑量水平和DNA斷裂水平,以此來判斷其輻射敏感性。在此基礎(chǔ)上,采取同樣方法檢測臨床患者腫瘤照射后誘導(dǎo)出的△mtDNA4977和DNA斷裂水平,結(jié)合放療效果判斷患者腫瘤輻射敏感性。對△mtDNA4977并結(jié)合腫瘤組織DNA雙鏈斷裂的檢測,為臨床提供一個經(jīng)濟(jì)快捷的預(yù)測腫瘤細(xì)胞輻射敏感性的指標(biāo)。
　　 Smac是細(xì)胞內(nèi)的促凋亡蛋白,其活性基團(tuán)SmacN7是促凋亡功能的最小單位,只在受損細(xì)胞內(nèi)發(fā)

3、揮作用。腫瘤細(xì)胞內(nèi)凋亡抑制蛋白(IAPs)的高表達(dá)會抑制細(xì)胞凋亡,降低腫瘤的輻射敏感性。Smac蛋白可以與IAP直接結(jié)合,解除其凋亡抑制功能,從而提高腫瘤的輻射敏感性,成為目前放射生物學(xué)的研究前沿方向。但是輻射耐受的腫瘤細(xì)胞內(nèi)Smac蛋白呈低表達(dá),且外源的SmacN7不能進(jìn)入細(xì)胞。因此,把SmacN7導(dǎo)入細(xì)胞,并明確其促凋亡機(jī)理,是本項(xiàng)目主要研究內(nèi)容。人ANTP是較早發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞穿膜肽。我們把Smac N7與ANTP連接形成融合肽,以AN