腸內(nèi)免疫營養(yǎng)和腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)對創(chuàng)傷術后大鼠腸屏障功能及免疫功能的影響.pdf

1、目的：機體受創(chuàng)傷后會發(fā)生一系列病理生理和代謝改變，全身處于免疫抑制和腸道粘膜受損狀態(tài)，腸道屏障功能降低，細菌移位和內(nèi)源性感染增加。給予適當?shù)臓I養(yǎng)支持，可降低各種并發(fā)癥的發(fā)生機率，促進患者的盡快恢復。然而普通的腸內(nèi)營養(yǎng)制劑尚不能有效地糾正創(chuàng)傷后機體腸道屏障功能和免疫功能抑制狀態(tài)，因此研究免疫營養(yǎng)和生態(tài)營養(yǎng)對創(chuàng)傷后機體的腸道屏障功能和免疫功能的影響有其重要意義。本實驗對Wistar大鼠行胃造瘺造模，通過對其術后早期分別給予普通飼料、腸內(nèi)營養(yǎng)

2、劑、腸內(nèi)免疫營養(yǎng)劑和腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)劑等不同的營養(yǎng)方式進行喂養(yǎng)，觀察各組大鼠胃造瘺術后恢復情況和并發(fā)癥發(fā)生率的差別，并通過常規(guī)HE染色和免疫組織化學法觀察各營養(yǎng)制劑對小腸屏障功能的影響，特別是觀察其對粘膜屏障和免疫屏障的影響，從而為其臨床應用提供理論和實驗的依據(jù)。 方法：選取40只清潔級Wistar大鼠，隨機分為四組，即對照組、腸內(nèi)營養(yǎng)組、腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組、腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)組，稱重后適應性飼養(yǎng)2天。通過無菌手術造好Wistar大鼠胃造瘺模

3、型，術后置于室溫22℃～26℃，濕度40％～70％的安靜、通風良好的環(huán)境中單籠飼養(yǎng)，除對照組給予正規(guī)大鼠專用飼料外，其余腸內(nèi)營養(yǎng)組、腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組、腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)組分別給予不同成分的腸內(nèi)營養(yǎng)劑(等氮等熱量)。腸內(nèi)營養(yǎng)組的腸內(nèi)營養(yǎng)劑為瑞素，其中添加精制蛋白粉和葡萄糖，平衡含氮量和熱量；腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組的腸內(nèi)營養(yǎng)劑為瑞能，其中添加精氨酸0.625g/100ml；腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)組的腸內(nèi)營養(yǎng)劑為瑞素，其中添加精制蛋白粉和葡萄糖以及由金雙歧片配置而成的

4、混懸液(現(xiàn)配現(xiàn)用)，劑量為1×108CFU/只·天，并添加精制蛋白粉和葡萄糖平衡含氮量和熱量。按熱量為180kcal/kg·day(746.64kJ/kg·day)標準，計算出每只大鼠所用相應的營養(yǎng)劑劑量，術后第一天給予所用全量的1/2，術后第二天給予所用全量的2/3，此后每天注入全量。所用營養(yǎng)劑分四次每4～6小時經(jīng)胃造瘺管推注，連續(xù)行腸內(nèi)營養(yǎng)7天。期間仔細觀察各組大鼠注入后反應，注意保護造瘺管，保持造瘺管通暢，并記錄各組大鼠術后一般情

5、況、術后并發(fā)癥和腹瀉發(fā)生的情況。喂養(yǎng)7天后予斷頭法處死各組大鼠，立即開腹距回盲部5cm處切取3cm長的末段回腸，置于10％中性甲醛中固定約12小時，然后常規(guī)石蠟包埋，制成石蠟切片：1、進行常規(guī)HE染色觀察各組大鼠小腸粘膜并測量相關腸粘膜形態(tài)學參數(shù)：小腸絨毛高度、腸腺隱窩深度、粘膜厚度以及絨毛表面積。2、用免疫組織化學方法檢測各組大鼠小腸粘膜標本中平均每高倍視野IgA+和CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)量并進行比較。 結(jié)果：1、

6、各組大鼠術后毛色、活動、術后并發(fā)癥，均以腸內(nèi)營養(yǎng)組為佳，尤其是腸內(nèi)免疫和生態(tài)營養(yǎng)組術后恢復更顯良好。由于樣本數(shù)較少，各組術后感染并發(fā)癥的差異無顯著性(p＞0.05)，但是各營養(yǎng)組特別是腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組和腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)組較明顯的低于對照組。 2、腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)組的腹瀉累計次數(shù)低于腸內(nèi)普通營養(yǎng)組、腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組(p＜0.05)。 3、小腸絨毛高度、腸腺隱窩深度、粘膜厚度以及絨毛表面積等相關的形態(tài)學參數(shù)測量值顯示，各腸內(nèi)營養(yǎng)組均優(yōu)于

7、對照組(p＜0.05,p＜0.01)，各腸內(nèi)營養(yǎng)組之間的差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。 4、對照組和普通腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠小腸粘膜IgA+細胞數(shù)明顯低于腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組和腸內(nèi)生態(tài)營養(yǎng)組(p＜0.05,p＜0.01)。 5、免疫組織化學方法所測結(jié)果顯示，對照組和普通腸內(nèi)營養(yǎng)組大鼠小腸粘膜CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)低于腸內(nèi)免疫營養(yǎng)組和生態(tài)營養(yǎng)組(p＜0.05,p＜0.01)。 結(jié)論：1、應用腸內(nèi)營養(yǎng)，特別是腸內(nèi)