鄰苯二甲酸二乙基己基酯對(duì)鼠胎肺發(fā)育的影響及作用機(jī)制.pdf

1、目的：研究孕鼠在不同鄰苯二甲酸二乙基己基酯（DEHP）暴露劑量下對(duì)子鼠胎肺發(fā)育的影響，并探討DEHP影響肺發(fā)育的作用機(jī)制。 方法：（1）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組：Sprague-Dawley大鼠（體重250 g-300g）受孕后，將34只孕鼠隨機(jī)分成4組：對(duì)照組（n=8）、低劑量組（n=8）、中劑量組（n=8）、高劑量組（n=10）。受孕后第12天（GD12）開始每天給孕鼠玉米油或含不同劑量DEHP的玉米油0.5ml灌胃：對(duì)照組給予玉米油

2、（DEHP0mg/kg/day）；低劑量組給予DEHP10mg/kg/day；中劑量組給予100mg/kg/day；高劑量組給予DEHP750mg/kg/day。取自然分娩的第1天子鼠，每籠隨機(jī)取2只子鼠（雌雄各一只），給子鼠腹腔注射戊巴比妥鈉（35mg/kg-1bw），麻醉后處死子鼠。（2）測(cè)量子鼠體重。（3）光鏡下觀察HE染色后右肺中葉組織病理學(xué)改變并進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析，測(cè)定輻射狀肺泡計(jì)數(shù)（RAC）和肺間質(zhì)比例，透射電鏡觀察左肺超微結(jié)構(gòu)

3、變化。（4）免疫組織化學(xué)LDP法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）及其特異性組織抑制劑（TIMP-2）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的表達(dá)。 結(jié)果：（1）孕鼠染毒情況：各組孕鼠均無死亡，但高劑量組有2只孕鼠發(fā)生流產(chǎn)，予以除外。在GD12時(shí)，各組孕鼠體重比較無差別（P>0.05），GD22時(shí)，高劑量組孕鼠體重明顯低于其他各組（P<0.01），中、低劑量組與對(duì)照組比較無顯著性差異（P>0.05）。（2）子鼠體重比較：與對(duì)照組體重（

4、6.80±0.73g）相比，各實(shí)驗(yàn)組子鼠體重明顯下降（P<0.01），中劑量組和高劑量組體重（5.59±0.86g，5.48±0.81g）下降比低劑量組（6.19±0.51g）更明顯（P<0.05）。（3）光鏡下RAC和肺間質(zhì)比例：低劑量組、中劑量組與對(duì)照組比較無顯著性差異（P>0.05），但高劑量組出現(xiàn)肺間質(zhì)增厚、間質(zhì)細(xì)胞增多，肺泡數(shù)目減少，RAC減小，肺間質(zhì)比例增大，與對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.05）。（4）肺電鏡超微結(jié)構(gòu)觀察

5、：對(duì)照組、低劑量組和中劑量組組織均無明顯病理性改變，但高劑量組有一些病理性變化：肺泡Ⅱ型細(xì)胞質(zhì)深染，核固縮，絨毛較少，板層小體增多，形態(tài)不規(guī)則。（5）各實(shí)驗(yàn)組的VEGF與對(duì)照組比較無顯著性差異（P>0.05），MMP-2的表達(dá)隨孕鼠暴露DEHP劑量的增加而增加，高、中、低劑量組MMP-2的表達(dá)高于對(duì)照組（P<0.001），各實(shí)驗(yàn)組間相比較也存在顯著性差異（P<0.001）；TIMP-2的表達(dá)隨劑量增加而減少，當(dāng)孕鼠暴露DEHP劑量達(dá)到1

6、00mg/kg/day時(shí)，TIMP-2的表達(dá)出現(xiàn)下降，僅高劑量組TIMP-2的表達(dá)與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論（1）孕鼠大劑量DEHP染毒時(shí)對(duì)自身有明顯的毒性作用。 （2）孕鼠DEHP染毒時(shí)對(duì)子鼠生長(zhǎng)有抑制作用，抑制程度與劑量成正比，高暴露劑量下子鼠的體重下降更明顯。 （3）孕鼠高劑量DEHP暴露時(shí)有抑制子鼠肺發(fā)育的作用。 （4）MMP-2的表達(dá)隨孕鼠暴露DEHP劑量的增加而增加，而T