大鼠臂叢根性撕脫傷后神經(jīng)病理性疼痛的行為學(xué)觀察和脊髓層面C-FOS,IBA-1,GFAP表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:建立臂叢根性撕脫傷后大鼠的神經(jīng)病理性疼痛的模型,運(yùn)用機(jī)械誘發(fā)痛和熱誘發(fā)痛在行為學(xué)層面上評(píng)估痛閾的變化,篩選出現(xiàn)神經(jīng)病理性疼痛的模型,后在脊髓頸膨大層面運(yùn)用C-FOS、GFAP、IBA-1染色觀察與神經(jīng)病理性疼痛相關(guān)的即刻反應(yīng)基因、星形膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞的變化情況,為臨床進(jìn)一步干預(yù)并治療這種疼痛提供依據(jù)。
　　 方法:建立SD大鼠后路全臂叢撕脫模型共56只(分7組:實(shí)驗(yàn)組6組及對(duì)照組一組,每組8只),實(shí)驗(yàn)組分為術(shù)后1天,4

2、天,7天,14天、21天、28天觀察組。術(shù)后1天,4天,7天,14天、21天、28天時(shí)采用Von-FreyFilament觀測各組大鼠雙側(cè)后肢的機(jī)械誘發(fā)痛,用熱誘發(fā)痛刺激器觀測熱誘發(fā)痛。于各時(shí)間點(diǎn)取材,行脊髓頸膨大切片,C-FOS蛋白DAB染色,GFAP、IBA-1免疫熒光染色,SPSS15.0軟件行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:1.一般情況:所有實(shí)驗(yàn)組大鼠均手術(shù)成功取材順利,無一只死亡。
　　 2.行為學(xué)觀測結(jié)果實(shí)驗(yàn)組大鼠在

3、術(shù)后1天時(shí)即出現(xiàn)雙側(cè)后肢機(jī)械痛閾的下降,后即趨于穩(wěn)定,痛閾下降的現(xiàn)象長期存在。熱誘發(fā)痛的結(jié)果顯示術(shù)后大鼠雙側(cè)后肢的熱痛閾未出現(xiàn)明顯的下降。
　　 3.C-Fos蛋白染色結(jié)果顯示:左全臂叢撕脫后大鼠頸段脊髓患側(cè)背角C-FOS表達(dá)在1天時(shí)就明顯增強(qiáng),隨后在4天時(shí)持續(xù)增強(qiáng),7天使開始下降,直到28天時(shí)仍舊有表達(dá),與健側(cè)背角和正常組同側(cè)背角的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4.星形膠質(zhì)細(xì)胞GFAP染色結(jié)果顯示左側(cè)全臂叢撕脫后大鼠頸段脊

4、髓患側(cè)背角GFAP表達(dá)在術(shù)后1天時(shí)出現(xiàn)增強(qiáng),4天時(shí)明顯增強(qiáng),直至術(shù)后28天時(shí)脊髓患側(cè)背角GFAP表達(dá)與健側(cè)背角和正常組同側(cè)背角的差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5.小膠質(zhì)細(xì)胞IBA-1染色結(jié)果顯示側(cè)全臂叢撕脫后大鼠頸段脊髓雙側(cè)背角IBA-1表達(dá)在1天時(shí)出現(xiàn)增強(qiáng),之后表現(xiàn)為持續(xù)的增強(qiáng),與正常組同側(cè)背角的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:1.一側(cè)全臂叢撕脫后大鼠雙側(cè)下肢出現(xiàn)的機(jī)械誘發(fā)痛痛閾下降的現(xiàn)象,與臂叢撕脫是有相關(guān)性的,可以用

5、來作為評(píng)估神經(jīng)病理性疼痛的指標(biāo)。證實(shí)后路單側(cè)全臂叢撕脫的大鼠是研究神經(jīng)病理性疼痛的可行的模型。
　　 2.C-Fos蛋白初期在左側(cè)全臂叢撕脫的大鼠患側(cè)脊髓背角的表達(dá)增強(qiáng)與撕脫暴力損傷相關(guān),隨后持續(xù)表達(dá)可能與慢性疼痛有關(guān)。
　　 3.脊髓膠質(zhì)細(xì)胞激活與痛覺敏化相關(guān)能夠引起痛覺敏化的因素也可激活脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞,GFAP作為星形膠質(zhì)細(xì)胞活性狀態(tài)的標(biāo)志,在左側(cè)全臂叢撕脫的大鼠患側(cè)脊髓背角表達(dá)自術(shù)后開始即出現(xiàn)的增強(qiáng)與慢性疼痛有關(guān)