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文檔簡介
1、本文選取小鼠肝癌細胞Hepa1-6為研究對象,通過L-選擇蛋白與小鼠淋巴結體外黏附實驗,分析L-選擇蛋白與腫瘤淋巴道轉移間的相關性;并檢測L-選擇蛋白與甘露糖受體(MR)的體外黏附,分析L-選擇蛋白與其配體-甘露糖受體(MR)間相互作用對腫瘤細胞轉移能力的影響等。 實驗方法:構建含有L-選擇蛋白的重組載體pcDNA3后轉染小鼠肝癌細胞Hepa1-6,篩選獲得穩(wěn)定表達L-選擇蛋白的細胞株。采用免疫組化、免疫熒光、RT-PCR、流式
2、細胞技術等,輔之以體外黏附實驗分析肝癌細胞Hepa1-6表面L-選擇蛋白的表達情況、L-選擇蛋白與其配體-甘露糖受體(MR)間相互作用對腫瘤細胞轉移能力的影響等,從而深入探討了L-選擇蛋白與腫瘤淋巴道轉移間的相關性。 實驗結果:大量提取重組質粒,PCR結果顯示1118bp處有特異條帶,與預期片段大小一致。重組L-Selectin表達載體轉染真核細胞Hepa1-6后48小時免疫熒光能檢測到目的蛋白的表達。G418篩選穩(wěn)定表達L-選
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