甘氨雙唑鈉對(duì)鼻咽癌移植瘤的時(shí)辰放射增敏作用.pdf

1、目的：通過(guò)觀察甘氨雙唑鈉（CMNa）對(duì)鼻咽癌荷瘤裸鼠時(shí)辰放射增敏后腫瘤生長(zhǎng)的影響，檢測(cè)腫瘤組織中HIF-lα、γ-H2AX和凋亡蛋白的表達(dá)水平，來(lái)探討甘氨雙唑鈉對(duì)鼻咽癌移植瘤的時(shí)辰放射增敏機(jī)制。
　　 方法：130只Balb/c裸鼠在統(tǒng)一光照條件下同步化飼養(yǎng)，建立統(tǒng)一的生物節(jié)律至少3周以上。建立統(tǒng)一的生物節(jié)律后，在裸鼠右側(cè)大腿外側(cè)處接種低分化鼻咽癌細(xì)胞（CNE-Ⅱ），建立裸鼠鼻咽癌移植瘤模型。成瘤并達(dá)到入組標(biāo)準(zhǔn)后，將112只移植

2、瘤裸鼠隨機(jī)分為3組：放療（radiotherapy，RT）N、RT+CMNa組、空白對(duì)照組，并將每一組按4個(gè)時(shí)辰3HALO（光照后小時(shí)，hours after light onset）、9HALO、15HALO、21HALO分為4個(gè)亞組。其中RT+CMNa組分別在3HALO、9HALO、15HALO、21HALO四個(gè)時(shí)間點(diǎn)前1小時(shí)給予腹腔注射甘氨雙唑鈉20mg/kg，并且RT組、RT+CMNa組在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別進(jìn)行單次放療，劑量為10G

3、y。時(shí)辰放療結(jié)束后24小時(shí)處死各亞組的一半裸鼠，獲取腫瘤標(biāo)本；剩余裸鼠測(cè)定再生長(zhǎng)延長(zhǎng)時(shí)N（regrowth delay time，TGD），繪制生長(zhǎng)曲線；用免疫組化法檢測(cè)各組腫瘤標(biāo)本中HIF-1α、γ-H2AX和凋亡蛋白的表達(dá)水平，并用免疫組化圖像分析軟件進(jìn)行半定量分析。本實(shí)驗(yàn)采用完全隨機(jī)單因素方差分析法對(duì)各組的免疫組化檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：各處理因素均對(duì)鼻咽癌裸鼠移植瘤有不同程度的抑制作用。通過(guò)對(duì)各組TGD的比

4、較，以RT+CMNa組對(duì)腫瘤的抑制效果最好。在該組中TGD：15HALO>21HALO>9HALO>3HALO，15HALO與3HALO的TGD比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。各組腫瘤標(biāo)本的免疫組化檢測(cè)結(jié)果（PI值）顯示：HIF-1α、γ-H2AX及凋亡蛋白的表達(dá)水平呈時(shí)間節(jié)律性，同時(shí)辰的放射增敏組和單純放療組之間HIF-1α、γ-H2AX及凋亡蛋白的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HIF-1α的表達(dá)在RT+CMNa組和RT組

5、中：3HALO>9HALO>21HALO>15HALO，其中15HALO與3HALO的HIF-1α表達(dá)水平比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。γ-H2AX的表達(dá)在 RT+CMNa組和 RT組中：15HALO>21HALO>9HALO>3HALO，其中15HALO與3HALO的γ-H2AX表達(dá)水平比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。凋亡蛋白的表達(dá)在RT+CMNa組和RT組中：15HALO>21 HALO>9HALO>3HALO，其中15HAL