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文檔簡介
1、目的:
8-Prenylnaringenin(8-PN)是迄今發(fā)現(xiàn)活性最強的植物雌激素,其改善實驗性絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的作用色有報道,但其具體機制是否通過影響骨形成或骨吸收仍未闡明。本研究擬觀察8-PN對小鼠成骨細胞株MC3T3-E1增殖、分化、礦化過程的影響,并從caveolin-1(小凹蛋白-1)角度探討8-PN調(diào)節(jié)成骨細胞MC3T3-E1分化過程的機制,從而試圖從骨形成途徑闡述其治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松機制。
方
2、法:
將不同濃度8-PN(10-5,10-6,10-7M)分別作用于增殖期MC3T3-E1(第2天)48小時,采用噻唑藍法(MTT)觀察對成骨細胞增殖的影響;作用于分化期細胞(第10、11天)48、72小時,觀察指標分別為細胞裂解液ALP活性(PNPP法)、上清液骨鈣素濃度(EIASA);對于礦化過程的影響,通過全程加入8-PN,在第28天用茜素紅法觀察礦化結(jié)節(jié)。在分化期采用Western Blotting方法觀察cave
3、olin-1蛋白表達變化。在上述實驗中,均以雌激素(10-8,10-10M)作為陽性對照進行觀察。
結(jié)果:
8-PN不影響成骨細胞的增殖;8-PN可升高分化期MC3T3-E1細胞ALP的活性、培養(yǎng)基骨鈣素濃度,有一定劑量依賴關(guān)系;在第28天,8-PN可促進成骨細胞礦化結(jié)節(jié)的形成。雌激素也呈現(xiàn)相似作用。10-5M8-PN促成骨細胞效應與10-8M雌激素效應相仿。8-PN可下調(diào)分化期MC3T3-E1細胞caveo
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