中藥補骨脂素在自體骨髓移植中的應用——黃世林教授治療急性粒細胞白血病的經驗總結.pdf

1、目的：導師黃世林教授從軍從醫(yī)60余年，他埋首岐黃，勤求故訓，不斷地繼承發(fā)揚，博采眾長，至今中西合璧，學養(yǎng)精深，在中醫(yī)，中西醫(yī)藥結合治療血液系統疾病等方面造詣頗深。他提出以“驅邪復正”為治則治療急性白血病，率先在臨床中應用純中藥補骨脂(psoralea fruits)提取物補骨脂素(psoralen，PSO)加長波紫外線(long wave ultraviolet A，UVA)，又稱PUVA，體外凈化骨髓，采用自體骨髓移植(autolog

2、ous bone marrow transplantation，ABMT)治療急性粒細胞白血病(acute granulocytic leukemia，AGL)。本研究的目的在于全面總結臨床療效、系統整理老師可貴的臨床經驗，并探討PUVA法抗白血病的部分作用機制。 方法：臨床研究分析1991年10月至2005年11月于我單位接受PUVA體外凈化ABMT的28例AGL病例的臨床資料。實驗研究選擇人類白血病HL-60、NB4和K56

3、2細胞為研究對象，Affymetrix Human U1332.0基因表達譜芯片檢測PUVA對人白血病細胞基因表達的影響；流式細胞儀(flow cytometry，FCM)測定PUVA后24小時細胞線粒體膜電位水平的變化、細胞Fas、FasL蛋白表達情況；熒光定量RT-PCR技術檢測PUVA后4小時細胞Fas、FasL mRNA的表達；免疫細胞化學法(immunocytochemistry，ICC)檢測Caspase8、Caspase3

4、蛋白的表達情況。應用SPSS11.5軟件進行數據的統計分析。 結果： 1、28例患者凈化前后骨髓單個核細胞中位數分別為8.65×109和9.93×109個(p=0.418＞0.05)。其中25例凈化前后骨髓單個核細胞中CD34+細胞中位百分數分別為1.96％和1.77％(p=0.543＞0.05)。 2、28例患者有27例獲得造血重建，中性粒細胞恢復至＞0.5×109/L的中位時間為+13天；血小板恢復至≥40×

5、109/L的中位時間為+16天。 3、在預處理過程中，28例患者均有不同程度的胃腸道反應，其中11例患者出現嘔吐；在ABMT恢復過程中，3例患者合并感染而出現發(fā)熱，2例合并出血。 4、28例患者中有8例在ABMT后中位時間7個月復發(fā)，總復發(fā)率為28.57％，1年復發(fā)概率為22.22％，2、3、5，7、10年復發(fā)概率均為29.63％。 5、隨訪中位時間52.5月，28例患者平均生存期為143.75±15.63月，9

6、5％可信區(qū)間為(113.11，174.39)；實際1年生存率為82.14％，2年生存率為75％，3、5、7、10年生存率均為71.43％；1年生存概率為81.74％，2年生存概率為73.22％，3、5、7、10年生存概率均為71.43％。 6、基因芯片結果示，PUVA抗白血病的作用主要涉及與細胞凋亡有關的蛋白代謝、蛋白質結構的折疊與修飾以及細胞表面受體介導的信號轉導途徑，細胞體現出凋亡及其相關功能基因的激活． 7、FCM

7、結果示PUVA作用后24小時HL-60、NB4和K562細胞線粒體膜電位水平、FasL蛋白表達明顯下降，Fas蛋白表達明顯升高。 8、熒光定量PCR檢測結果示PUVA作用后4小時Fas mRNA表達升高，FasLmRNA表達下降。 9、ICC檢測結果示PUVA可促進細胞Caspase8、Caspase3蛋白表達。 結論： 1、依據PSO的光敏特性及PUVA的抗白血病活性，在國內外率先將PSO應用于ABMT