缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠Akt表達的影響及水蛭注射液的干預.pdf

1、目的:從Akt信號傳導通路探討水蛭注射液后處理聯(lián)合缺血后處理對腦缺血再灌注損傷后大鼠腦保護作用的可能機制,為后處理臨床應用提供實驗依據(jù)。
　　方法:60只雄性SD大鼠,隨機分為5組,即:假手術組(SO組)、缺血-再灌注對照組(C組)、缺血后處理組(P組)、水蛭后處理組(L-H組)、水蛭后處理+缺血后處理組(P-H組)。SO組:僅實施手術但不進行腦缺血操作,同時腹腔注射生理鹽水4ml;C組:實施90min的腦缺血和24h的再灌注,在

2、再灌注即刻腹腔注射生理鹽水4ml;P組:在再灌注即刻自CCA內(nèi)抽出線栓30s,然后將線栓重新置入30s,反復進行此操作3次后進行再灌注24h,并在再灌注即刻腹腔注射生理鹽水4ml;L-H組:在再灌注即刻,腹腔注射水蛭注射液4mg/kg(用生理鹽水稀釋至4ml),并自CCA內(nèi)抽出線栓持續(xù)再灌注24h;P-H組:在C組操作的基礎上,在再灌注即刻,腹腔注射水蛭注射液4mg/kg。再灌注24小時后,參考Longa的5分制法對老鼠進行神經(jīng)功能缺失

3、體征評分。取大鼠缺血側(cè)頂葉腦皮質(zhì)為檢測對象,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應檢測腦組織AktmRNA轉(zhuǎn)錄水平,用免疫印跡法檢測Akt蛋白磷酸化水平的改變。
　　結果:(1)各組神經(jīng)功能評分的比較:假手術組大鼠未見神經(jīng)功能缺損;除假手術組外,其余各組與對照組比較均有不同程度下降,其中:后處理組與對照組比較神經(jīng)功能缺損評分稍有降低(P<0.05),水蛭后處理組與對照組比較評分較低(P<0.05);聯(lián)合后處理組與對照組比較評分明顯下降(P<0.0

4、1);聯(lián)合后處理組神經(jīng)功能既低于后處理組(P<0.05),也低于水蛭后處理組(P<0.05)。(2)各組 Akt蛋白磷酸化水平的比較:假手術組有少量蛋白表達;與假手術組比較,對照組蛋白表達明顯升高(P<0.05);與對照組比較,缺血后處理組、水蛭后處理組、聯(lián)合后處理組Akt蛋白磷酸化水平均升高(P<0.01),其中聯(lián)合后處理組蛋白磷酸化水平更為顯著(P<0.01)。(3)Akt mRNA表達的比較:假手術組有少量Akt mRNA轉(zhuǎn)錄;與