槲皮素對H2O2所致PC12細胞氧化損傷的保護效果與機制研究.pdf

1、目的：
　　研究槲皮素(Quercetin)對PC12細胞增殖的影響以及防止H2O2氧化損傷PC12細胞的保護效果，同時初步探討其作用機制。
　　方法：
　　通過MTT比色法檢測槲皮素對PC12細胞增殖的影響。同時用H2O2誘導PC12細胞建立氧化損傷模型，通過MTT和LDH比色法檢測槲皮素對H2O2誘導PC12細胞損傷的細胞存活率的影響，進一步確定槲皮素的保護效果;通過Hoechst-33342染色、PI染色和TUN

2、EL法檢測槲皮素防止PC12細胞和海馬神經元遭受H2O2損傷在細胞形態(tài)上的變化特征和通過流式細胞術(FCM)檢測槲皮素對PC12細胞凋亡情況的影響。在槲皮素的保護機制研究中，首先對比檢測槲皮素對PC12細胞內ROS水平和MDA的含量，同時檢測PC12細胞內抗氧化酶系中SOD、CAT、GSH-PX的活性，討論槲皮素對遭受氧化應激的PC12細胞內氧化與抗氧化系統(tǒng)之間的平衡的影響;再通過western-blotting免疫印跡法檢測槲皮素保護

3、PC12細胞抵抗H2O2氧化損傷時，細胞內Caspase-3、Bcl-2、Bax和P53等調控細胞凋亡的相關因子的表達情況，從而初步探討槲皮素發(fā)揮保護作用的機制。
　　結果：
　　(1)、在一定濃度范圍內，檢測結果發(fā)現槲皮素對PC12細胞沒有細胞毒性作用。
　　(2)、經過MTT法和LDH法檢測得出槲皮素能夠明顯的降低H2O2誘導PC12細胞產生的氧化損傷。
　　(3)、通過形態(tài)學的研究得出槲皮素能增強PC12細

4、胞對H2O2誘導損傷的承受能力，減少細胞核濃縮和邊緣化以及凋亡小體出現等細胞凋亡的表征現象發(fā)生，也能減少H2O2所致海馬神經元凋亡。
　　(4)、通過對細胞內氧化與抗氧化物的檢測得出槲皮素能夠提高細胞內SOD、CAT和GSH-PX等抗氧化酶活性，降低細胞內ROS水平，減少MDA產生，削弱H2O2對PC12細胞的氧化損傷。
　　(5)、對PC12細胞內凋亡相關因子表達量的檢測發(fā)現槲皮素能夠抑制酶原型Caspase-3裂解和Ba

5、x、p53等凋亡蛋白的表達，且提高Bcl-2抗凋亡蛋白的表達。
　　結論：
　　本研究得出，槲皮素對PC12細胞沒有毒性，且能夠減弱H2O2誘導PC12細胞和海馬神經元發(fā)生氧化損傷，改善細胞凋亡表征現象的發(fā)生。其可能的機制為:槲皮素通過增加SOD、CAT和GSH-PX等抗氧化酶系，降低因H2O2誘導產生的ROS，進一步減少胞內脂質過氧化生成MDA;此外，槲皮素發(fā)揮保護作用的機制還可能通過抑制細胞凋亡觸發(fā)因子（如ROS）激活C