吉馬酮抑制肝癌Bel7402細胞增殖機制初步研究.pdf

1、莪術(shù)是藥用價值極高的中藥材,具有抗炎保肝,抗菌抗血栓形成,抗腫瘤的功效,在中醫(yī)臨床上有著廣泛的應用。吉馬酮是從莪術(shù)中提取的一種倍半萜類化物,據(jù)報道有顯著的抑癌效果,但是其抗癌機理尚未完全揭示。本文以肝癌Bel7402細胞為研究材料,應用MTT,Flow Cytometry,Western Blotting等方法研究吉馬酮對肝癌Bel7402細胞的增殖影響,主要研究結(jié)果包括以下幾個方面:
　　1.吉馬酮選擇性地抑制人肝癌Bel740

2、2細胞增殖,且呈現(xiàn)濃度依賴性,但是沒有明顯的時間依賴性。MTT比色法結(jié)果表明,吉馬酮能夠顯著抑制Bel7402細胞的增殖,且藥物濃度越高、其抑制作用越顯著,而24h與48h的抑制效果無統(tǒng)計學差異,24h處理的半抑制濃度約為160μM,但同樣處理對正常肝細胞LO2沒有明顯的毒副作用。
　　2.吉馬酮劑量依賴性地促進人肝癌細胞Bel7402的凋亡和上調(diào)活性氧含量。通過Hochest染色和流式細胞檢測,發(fā)現(xiàn)吉馬酮可以促進Bel7402細

3、胞的凋亡,且藥物濃度越高,抑制作用越明顯。Western Blotting檢測凋亡相關(guān)蛋白的表達,表明吉馬酮可以顯著促進抑癌基因P53和Bax的表達,抑制抗凋亡因子Bcl-2的表達。同時流式測定結(jié)果表明吉馬酮可以濃度依賴性地提高Bel7402的活性氧濃度。以上結(jié)果表明吉馬酮有促進Bel7402細胞凋亡的效果并且涉及Bel7402細胞的氧化性損傷。
　　3.吉馬酮促進Bel7402細胞凋亡是通過JAK2/STAT3信號通路實現(xiàn)的。用

4、JAK2/STAT3信號通路的激動劑白細胞介素IL-6和吉馬酮對Bel7402進行不同處理后,Western Blotting檢測結(jié)果表明吉馬酮下調(diào)細胞中p-STAT3水平而IL-6上調(diào)p-STAT3水平,與此同時,p-STAT3的下游抑癌基因P53的蛋白表達水平呈現(xiàn)相反變化。這些結(jié)果說明吉馬酮可以抑制Bel7402細胞中組成性激活因子STAT3的磷酸化,從而上調(diào)其下游基因P53的蛋白表達水平。
　　以上結(jié)果表明,吉馬酮有非常明顯