糖基化終產(chǎn)物對(duì)血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)分泌甲狀旁腺激素相關(guān)肽及細(xì)胞鈣化的影響.pdf

1、目的:觀察糖基化終產(chǎn)物(AGEs)促體外培養(yǎng)的人血管平滑肌細(xì)胞鈣化的影響，及其對(duì)血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)及分泌甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrP)功能的影響，并探討AGEs影響血管平滑肌細(xì)胞鈣化發(fā)生的相關(guān)機(jī)制。
　　方法:傳代培養(yǎng)人血管平滑肌細(xì)胞，體外制備糖基化修飾的牛血清白蛋白(AGE-BSA)，用孵育好的、不同濃度的AGE-BSA與人血管平滑肌細(xì)胞共培養(yǎng)相同時(shí)間，根據(jù)干預(yù)條件的不同，分為無(wú)干預(yù)的空白組、400mg/LBSA陰性對(duì)照組、5

2、0、100、200、400mg/L AGE-BSA干預(yù)組;分別檢測(cè)各組細(xì)胞總鈣含量及堿性磷酸酶(ALP)活性;酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)各組細(xì)胞甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrP)的分泌量;實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)PTHrP、核心結(jié)合因子α亞單位1（cbfα1）及骨形成蛋白2(BMP-2)等基因在各組細(xì)胞中的表達(dá)量。
　　結(jié)果:糖基化終產(chǎn)物(AGEs)增加血管平滑肌細(xì)胞中的鈣含量、提高堿性磷酸酶活性(P＜0.05)，且隨著干預(yù)濃度的

3、增加，細(xì)胞的鈣含量及堿性磷酸酶活性逐漸增加，呈濃度依賴性;AGEs促進(jìn)cbfα1、BMP-2及甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrP)等基因mRNA在血管平滑肌細(xì)胞的表達(dá)，且隨著干預(yù)濃度的增加，以上基因的相對(duì)表達(dá)量均呈逐漸增加的趨勢(shì)，這在較高濃度組較為顯著(P＜0.05);同時(shí)也觀察到不同濃度AGEs可抑制PTHrP在血管平滑肌細(xì)胞的分泌量(P＜0.05)，且隨著AGEs干預(yù)濃度增加，PTHrP分泌量呈逐漸減少的趨勢(shì)，然而，200 mg/L A